| 猪干扰素α2亚型的表达纯化及抗病毒活性测定 |
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| 引用本文： | 方剑玉,白杰,席艳艳,郎利敏,徐彬,张青娴,李海利,王治方,李绍钰,王克领.猪干扰素α2亚型的表达纯化及抗病毒活性测定[J].畜牧与兽医,2022(4):87-92. |
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| 作者姓名： | 方剑玉 白杰 席艳艳 郎利敏 徐彬 张青娴 李海利 王治方 李绍钰 王克领 |
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| 作者单位： | 1. 河南省农业科学院畜牧兽医研究所;2. 畜禽繁育与营养调控河南省重点实验室 |
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| 摘 要： | 为研究重组猪干扰素α2亚型(porcine interferonα2, poIFN-α2)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)的抑制作用，试验构建了pCSMH-poIFN-α2的大肠杆菌表达载体，采用温度诱导poIFN-α2表达后，收集包涵体并复性后，采用亲和层析的方法对poIFN-α2进行纯化。采用Western blot方法检测纯化后蛋白的特异性，结果显示该蛋白具有较好的特异性和反应原性。用不同浓度的重组poIFN-α2处理MARC-145和PAM细胞24 h后，接种PRRSV(1 000 TCID50)。24 h后收集细胞，采用荧光定量PCR检测细胞内PRRSV ORF7的核酸水平，同时检测细胞上清液中PRRSV的TCID50。结果证明大肠杆菌表达的重组poIFN-α2可以有效抑制PRRSV的增殖。进一步检测重组poIFN-α2在PAM细胞上诱导干扰素刺激基因(ISG)的水平，结果证明重组poIFN-α2可有效诱导PAM细胞内IS...
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| 关 键 词： | 猪干扰素α2 抗病毒活性 表达 猪繁殖与呼吸综合征病毒 干扰素刺激基因 |
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