| 牛病毒性腹泻病毒和牛冠状病毒双重纳米RT-PCR检测方法的建立及应用 |
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| 引用本文： | 魏宇,王海璐,孙飞雁,郭利,程悦宁,王全凯.牛病毒性腹泻病毒和牛冠状病毒双重纳米RT-PCR检测方法的建立及应用[J].畜牧与兽医,2022(3):101-105. |
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| 作者姓名： | 魏宇 王海璐 孙飞雁 郭利 程悦宁 王全凯 |
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| 作者单位： | 1. 吉林农业大学中药材学院;2. 中国农业科学院特产研究所 |
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| 基金项目： | 吉林省科技发展计划基金(20200301016RQ)； |
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| 摘 要： | 本文建立了一种同时检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和牛冠状病毒(BCoV)2种病原的双重纳米RT-PCR方法。采用BVDV 5′-UTR基因序列(GenBank登录号：AB040132.1)和BCoV的N基因保守序列(GenBank登录号：KX982264.1)设计出一对BVDV特异性引物和一对BCoV的特异性引物，结果表明此方法对牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)、牛副流感病毒3型(BPIV3)和牛轮状病毒(BRV)均无交叉反应，特异性良好。同时，应用此方法检测33份腹泻牛的临床样品和25份腹泻鹿的临床样品，结果得出BVDV、BCoV和2种病原混合感染的牛样品阳性率分别为15.15%、36.36%和6.06%。鹿样品感染BVDV、BCoV和2种病原混合感染的阳性率分别为28%、8%和8%。此外，敏感性试验结果为常规RT-PCR敏感性的10倍，最低检出限为1 fg。研究表明，本文建立的该方法快速、灵敏、简捷，具有较强的特异性、敏感性，可适用于大批量临床样品检测，为反刍动物相关病毒性腹泻的诊断和防控提供一定技术支撑。
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| 关 键 词： | 牛病毒腹泻病毒 牛冠状病毒 双重纳米RT-PCR |
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