| 大鼠肝细胞系BRL-3A细胞Hsp70过表达条件的优化 |
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| 引用本文： | 计 红,薛琳琳,耿仁德,郭景茹,臧 琳,王建发,孔凡志,齐艳萍,杨焕民,郭 丽,蒲丽君.大鼠肝细胞系BRL-3A细胞Hsp70过表达条件的优化[J].黑龙江畜牧兽医,2014(5):34-38. |
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| 作者姓名： | 计 红 薛琳琳 耿仁德 郭景茹 臧 琳 王建发 孔凡志 齐艳萍 杨焕民 郭 丽 蒲丽君 |
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| 摘 要： | 为了使热休克蛋白70(heat shock protein 70,Hsp70)在BRL-3A细胞中过表达,试验以带有标签基因的腺病毒感染BRL-3A细胞,根据感染效率初筛病毒感染的最适浓度和作用时间;然后用初筛出的最适浓度(4×107,2×107,1×107,0.5×107,0.25×107pfu/mL)和时间(24 h和48 h)感染BRL-3A细胞,优化Hsp70重组腺病毒感染BRL-3A细胞的条件,并应用荧光定量RT-PCR和免疫蛋白印记方法检测Hsp70的mRNA和蛋白表达量。结果表明:当用1×107pfu/mL病毒AdCMV-Hsp70按照最佳感染条件的感染复数(MOI)=20感染BRL-3A细胞48 h时,能使Hsp70表达量比病毒空载体感染细胞和无病毒的对照组细胞极显著升高(P0.01)。
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