小地老虎几丁质脱乙酰基酶基因的克隆与原核表达 |
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引用本文: | 樊东,郭博智,高艳玲,赵奎军,王晓云.小地老虎几丁质脱乙酰基酶基因的克隆与原核表达[J].东北农业大学学报,2013(4):126-131. |
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作者姓名: | 樊东 郭博智 高艳玲 赵奎军 王晓云 |
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作者单位: | 东北农业大学农学院 |
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基金项目: | 黑龙江省博士后科研启动基金(LBH-Q09171);国家现代农业产业技术体系建设专项基金(CARS-4) |
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摘 要: | 几丁质脱乙酰基酶(Chitin deacetylase,CDA)可以将几丁质修饰为壳聚糖,在昆虫几丁质代谢中具有重要作用。研究以小地老虎(Agrotis ipsilonHufngel)5龄幼虫虫体为材料提取总RNA,利用RT-PCR和RACE技术,扩增得到小地老虎几丁质脱乙酰基酶基因的cDNA序列。该序列含有2 048个碱基,包括一个1 626个碱基的开放读码框,编码541个氨基酸,分子质量约为61.7 ku,多肽的等电点为5.03。推导得到的氨基酸序列与其他昆虫,尤其是鳞翅目昆虫的几丁质脱乙酰基酶高度同源。所获小地老虎CDA基因的cDNA序列已登录GenBank并获得登录号,登录号为JQ012932。将CDA基因连接到PET21b载体上转入到BL21中诱导表达,SDS-PAGE电泳得到目的蛋白条带。
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关 键 词: | 小地老虎 几丁质脱乙酰基酶 克隆 序列分析 原核表达 |
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