| 鹅掌楸ISSR-PCR反应体系的建立及优化 |
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| 引用本文： | 占志勇,徐刚标.鹅掌楸ISSR-PCR反应体系的建立及优化[J].中南林业科技大学学报,2010,30(6). |
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| 作者姓名： | 占志勇 徐刚标 |
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| 作者单位： | 中南林业科技大学林木遗传育种实验室,湖南,长沙,410004 |
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| 基金项目： | 湖南省林业厅重点项目 |
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| 摘 要： | 为建立鹅掌楸简单序列重复区间扩增ISSR的PCR优化反应体系,以鹅掌楸叶片基因组DNA为材料,系统地测试了模板DNA、引物、dNTPs、Mg2+浓度、TaqDNA聚合酶用量及退火温度对ISSR-PCR反应体系的影响。结果表明:优化的PCR反应体系为:20μL总体系中,含30 ng模板DNA,0.3μmol.L-1随机引物,0.2 mmol.L-1dNTPs,1.4 mmol.L-1Mg2+,0.8 UTaqDNA聚合酶;最佳退火温度为60℃;PCR反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,60℃退火45 s,72℃延伸2 min;45个循环;72℃再延伸7 min。
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| 关 键 词： | 分子生物学 鹅掌楸 叶片基因组DNA 优化 |
Establishment and optimization of ISSR-PCR system for Liriodendron |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ISSR-PCR |
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