转基因克隆牛外源基因整合位点的检测 |
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引用本文: | 王敬姣,张明月,谭贝贝,张萃,李冬杰,戴蕴平,李宁,李世杰.转基因克隆牛外源基因整合位点的检测[J].畜牧兽医学报,2014(4):553-558. |
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作者姓名: | 王敬姣 张明月 谭贝贝 张萃 李冬杰 戴蕴平 李宁 李世杰 |
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作者单位: | 河北农业大学生命科学学院;河北科技大学生物科学与工程学院;中国农业大学农业生物技术国家重点实验室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(31372312);河北省自然基金项目(C2011204001) |
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摘 要: | 确定外源基因的整合位点是获得转基因动物后的首要任务。本试验应用TAIL-PCR得到了2头转入人溶菌酶基因克隆牛外源基因的整合位点,结果表明:2头转基因个体中外源基因均整合在受体基因组上,其中WS个体外源基因整合在牛24号染色体的基因组克隆(NW003104566.1)中。YW个体中外源基因整合在牛16号染色体的基因组克隆(NW003104440.1)中,整合位点位于LOC10030和RGL1基因之间。综上表明,在WS和YW个体中,外源基因的整合分别造成受体染色体238和228bp核苷酸的缺失。4个整合片段(InS1InS4)的末端均与拓扑异构酶I作用位点的共有序列相连。在WS个体中外源基因与染色体的整合连接处(InS1InS3)存在1nt的同源序列。在整合片段InS2、InS3、InS4中表现出共同的相似处,即均存在具有间隔的短的同源序列。
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关 键 词: | 转基因克隆牛 TAIL-PCR 整合位点 |
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