| ORFV-Yulin株的分离鉴定及其B2L基因在昆虫杆状病毒系统中的表达 |
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| 引用本文： | 冯 平,李云章,孙丰廷,等.ORFV-Yulin株的分离鉴定及其B2L基因在昆虫杆状病毒系统中的表达[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2017,45(9):32-38. |
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| 作者姓名： | 冯 平 李云章 孙丰廷 等 |
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| 作者单位： | 内蒙古农业大学 兽医学院;榆林学院 生命科学学院,内蒙古农业大学 兽医学院,武汉中拓康明生物科技有限公司 |
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| 基金项目： | 陕西省科技厅农业科技创新与攻关项目（2016NY-120)；陕西省科技厅重大统筹项目（2014KTDZ02-01）；陕西省教育厅专项科研计划项目（14JK1860）；榆林学院重点项目（14YK41） |
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| 摘 要： | 【目的】从榆林市具有典型羊口疮症状的陕北白绒山羊唇结痂病料中分离羊口疮病毒(Orf virus,ORFV),克隆分析其B2L基因序列,并通过昆虫杆状病毒表达B2L基因。【方法】利用牛肾传代细胞进行ORFV的分离培养,通过PCR的方法从分离到的病毒中扩增出B2L全长基因,测序后进行序列及遗传进化分析。利用扩增所得的B2L基因构建昆虫杆状病毒表达载体,包装出杆状病毒后侵染sf9细胞,并通过SDS-PAGE、Western-blot以及质谱鉴定等方法验证目的基因的表达情况。【结果】成功分离出1株羊口疮病毒,命名为ORFV-Yulin株;扩增的B2L全长基因长度为1 137bp,与Hub13和GY-AHF10株亲缘关系最近,核苷酸序列和氨基酸序列的相似性分别为99%和99.2%。通过昆虫杆状病毒表达系统成功表达了B2L基因,获得了47ku的重组蛋白。【结论】从榆林市陕北白绒山羊中获得了羊口疮病毒分离株(ORFV-Yulin);通过昆虫杆状病毒表达系统成功表达了ORFV-Yulin株的B2L基因。
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| 关 键 词： | 羊口疮病毒 B2L基因 昆虫杆状病毒表达系统 |
| 收稿时间： | 2017/4/20 0:00:00 |
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