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基因C型鸭肝炎病毒VP1基因的克隆表达及其多克隆抗体的制备(
引用本文:赵立娜,崔言顺,任建亭,李建亮,黄兵,李玉峰,马秀丽.基因C型鸭肝炎病毒VP1基因的克隆表达及其多克隆抗体的制备([J].浙江农业学报,2011,23(2):0.
作者姓名:赵立娜  崔言顺  任建亭  李建亮  黄兵  李玉峰  马秀丽
作者单位:1.山东农业大学 动物医学院,山东 泰安 271018;2山东省农业科学院 家禽研究所,山东省家禽疫病诊断与免疫重点实验室 山东 济南 250023;3山东省东营市广饶县中等专业中学,山东 广饶 257300)
基金项目:山东省自然科学基金,家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放课题,山东省优秀中青年科学家科研奖励基金
摘    要:采用RT-PCR方法,扩增基因C型DHV JFX08株的VP1基因,与pMD18-T载体进行连接,构建新型DHV VP1基因克隆重组质粒。然后将VP1基因定向插入到pET-32a(+)表达载体中,筛选原核表达载体pET-32a-VP1,进行IPTG诱导表达。SDS-PAGE电泳分析表明,基因C型DHV-VP1基因可在大肠杆菌中稳定高效的表达。Western-blot检测表明,表达产物可与基因C型DHV阳性血清发生特异性反应。将纯化的重组蛋白免疫4周龄SPF鸡,以纯化的VP1重组蛋白和基因C型DHV全病毒分别包板,制备的抗血清ELISA效价分别可达1∶25 600,1∶51 200,表明该重组蛋白具有良好的免疫原性。

关 键 词:鸭肝炎病毒  基因C型  VP1基因  克隆表达  多克隆抗体  

Cloning and expression of VP1 gene of Duck hepatitis virus genotype C and preparation of its polyclonal antibody
ZHAO Li-na,CUI Yan-shun,REN Jian-ting,LI Jian-liang,HUANG Bing,LI Yu-feng,MA Xiu-li.Cloning and expression of VP1 gene of Duck hepatitis virus genotype C and preparation of its polyclonal antibody[J].Acta Agriculturae Zhejiangensis,2011,23(2):0.
Authors:ZHAO Li-na  CUI Yan-shun  REN Jian-ting  LI Jian-liang  HUANG Bing  LI Yu-feng  MA Xiu-li
Institution:1College of Animal Science & Veterinary Medicine, Shandong Agricultural University, Tai'an 271018, China; 2Institute of Poultry Science, Shandong Academy of Agricultural Sciences, Jinan 250023, China; 3Secondary Specialized School in Guangrao County, Shandong Province, Guangrao 257300, China
Abstract:
Keywords:Duck hepatitis virus  genotype C  VP1 gene  cloning and expression  polyclonal antibody  
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