| 猪胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅱ基因的克隆、表达及其免疫原性 |
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| 引用本文： | 严克霞,刘建杰,吴斌,汤细彪,蔡利军,杨明柳,陈焕春,周锐.猪胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅱ基因的克隆、表达及其免疫原性[J].农业生物技术学报,2006,14(4):493-497. |
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| 作者姓名： | 严克霞 刘建杰 吴斌 汤细彪 蔡利军 杨明柳 陈焕春 周锐 |
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| 作者单位： | 1. 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室动物病原分室,武汉,430070
2. 海口农工贸(罗牛山)股份有限公司,海口,570125 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;教育部跨世纪优秀人才培养计划 |
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| 摘 要： | 以本实验室分离的猪胸膜肺炎放线杆菌血清2型(Actinobacilluspleuropneumoniaeserotype2,APP-2)菌株HB08的基因组为模板,扩增了2871bp的APP毒素Ⅱ的结构基因apxIIA,并克隆到pET-28a原核表达载体中构建重组表达质粒pET28aIIA,转化到大肠杆菌(Escherichiacoli)BL21(DE3),经SDS-PAGE和Westernblot分析表明,表达的重组蛋白具有良好的反应活性。将表达的蛋白经或不经复性处理,与纯化的天然毒素Ⅱ分别免疫昆明小鼠,同时设PBS空白对照组,每组12只,间隔2周免疫2次,采血检测其抗体效价,二免后2周用致死剂量的APP血清7型(APP-7)菌株(1.08×108CFU(菌落形成单位,colonyformunit)/只)腹腔攻击。结果显示,复性蛋白组的保护率为83.3%,非复性蛋白组的保护率为58.3%,天然毒素蛋白对照组保护率为91.7%,空白对照组小鼠全部死亡,说明复性的重组毒素Ⅱ具有良好的免疫原性。
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| 关 键 词： | 胸膜肺炎放线杆菌 毒素Ⅱ 克隆 原核表达 免疫原性 |
| 文章编号： | 1006-1304（2006）04-0493-05 |
| 收稿时间： | 2005-09-26 |
| 修稿时间： | 2005-12-14 |
Cloning, Expression and Immunogenic Characterization of apxⅡA Gene of Actinobacillus pleuropneumoniae |
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| YAN Ke-xia,LIU Jian-jie,WU Bin,TANG Xi-biao,CAI Li-jun,YANG Ming-liu,CHEN Huan-chun,ZHOU Rui.Cloning, Expression and Immunogenic Characterization of apxⅡA Gene of Actinobacillus pleuropneumoniae[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2006,14(4):493-497. |
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| Authors: | YAN Ke-xia LIU Jian-jie WU Bin TANG Xi-biao CAI Li-jun YANG Ming-liu CHEN Huan-chun ZHOU Rui |
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