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| PRRSV GP5蛋白在重组牛痘病毒中的表达与鉴定 | |
| 引用本文： | 田野,张雏军,林燕,王群,杨涛,步志高,童光志,张守发,吴东来.PRRSV GP5蛋白在重组牛痘病毒中的表达与鉴定[J].中国预防兽医学报,2009,31(11). |
| 作者姓名： | 田野 张雏军 林燕 王群 杨涛 步志高 童光志 张守发 吴东来 |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;延边大学,农学院,吉林,龙井,133400 2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 3. 中国农业科学院,上海兽医研究所,上海,200241 4. 延边大学,农学院,吉林,龙井,133400 |
| 基金项目： | 国家863计划，黑龙江省自然科学基金重点项目 |
| 摘 要： | 为构建表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5重组牛痘病毒,本研究通过RT-PCR获得PRRSV CH-1a株GP5蛋白基因,将其克隆至pMD18-T栽体.经测序鉴定正确后,将该片段作为目的基因亚克隆至转移质粒pSC11中,构建重组转移质粒(pSC11-GP5).将pSC11-GP5转染WR株牛痘病毒感染的TK-143细胞.与牛痘病毒进行同源重组.在舍有X-gal的琼脂培养基上进行蓝斑筛选,获得了含有PRRSV GP5基因的重组病毒(rWR-PRRSV-GP5).IFA及动物试验表明,重组病毒表达了PRRSV GP5蛋白,并在免疫小鼠体内诱生了较强的PRRSV抗体.实验表明,该重组病毒所表达的PRRSV GP5蛋白保持了良好的抗原性,为进一步研究PRRSVGP5蛋白免疫原性提供了基础数据,也为PRRS重组活载体疫苗的研究奠定了基础. |
| 关 键 词： | 猪生殖与呼吸综合征病毒 GP5蛋白 重组牛痘病毒 |
Expression of PRRSV GP5 in recombinant vaccinia virus |
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| TIAN Ye,ZHANG Wei-jun,LIN Yan,WANG Qun,YANG Tao,BU Zhi-gao,TONG Guang-zhi,ZHANG Shou-fa,WU Dong-lai.Expression of PRRSV GP5 in recombinant vaccinia virus[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2009,31(11). | |
| Authors: | TIAN Ye ZHANG Wei-jun LIN Yan WANG Qun YANG Tao BU Zhi-gao TONG Guang-zhi ZHANG Shou-fa WU Dong-lai |
| Abstract: | The GP5 gene of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) CH-1a strain was amplified from the PRRSV genome by RT-PCR, and cloned into the transfer plasmid pSC11 to produce pSC11-GPS, Recombinant vaccinia virus containing the GP5 gene (rWR-PRRSV-GPS) was generated through homologous recombination between pSC11-GP5 and vaccinia virus WR strain in TK-143 cells, purified by plaque assay and identified by PCR. Expression of the GP5 protein was detected by SDS-PAGE. Antigenicity of the recombinant GP5 protein was confirmed by indirect immunofluorescence assay (IFA). Inoculation to mice with rWR-PRRSV-GP5 induced specific humoral immune responses against PRRSV. |
| Keywords: | porcine reproductive and respiratory syndrome virus GP5 protein recombinant vaccinia virus |
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