卵泡刺激素诱导鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化的研究 |
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引用本文: | 蒋一秀,许厚强,左其生,张蕾,李东,施青青,张亚妮,李碧春.卵泡刺激素诱导鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化的研究[J].中国家禽,2014(13). |
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作者姓名: | 蒋一秀 许厚强 左其生 张蕾 李东 施青青 张亚妮 李碧春 |
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作者单位: | 贵州大学动物科学学院 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(31272429、31301959);江苏高校优势学科建设工程资助项目 |
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摘 要: | 文章探讨了卵泡刺激素(FSH)诱导鸡胚胎干细胞(ESCs)向雄性生殖细胞分化的作用效果。首先对FSH的适宜诱导浓度进行筛选,再将传至2代的ESCs,在RA和支持细胞诱导的基础上添加适宜浓度的FSH进行诱导,通过形态学观察、实时荧光定量PCR及免疫细胞化学对诱导结果进行检测。筛选出适宜的FSH浓度为25 ng/mL。单独使用FSH诱导,未出现类SSCs样细胞;FSH与支持细胞诱导至第6天出现类胚体,至第12天,出现少量精原样细胞;FSH联合支持细胞和维甲酸(RA)进行诱导,至第2天出现类胚体,第12天出现类SSC样细胞。实时荧光定量PCR结果显示,FSH+支持细胞组、FSH+支持细胞+RA组中,Stra8、integrinβ1、Dazl表达量都持续上调,ESCs标记基因Nanog、Sox2表达量均呈持续下调趋势。添加FSH的诱导组中Stra8的表达量相对于各对照组上调显著。FSH单独诱导不能引起ESCs向雄性生殖细胞分化,但具有促进支持细胞和RA诱导ESCs向雄性生殖细胞分化的作用效果,该结果为进一步研究雄性生殖细胞的形成和调控机制提供理论基础。
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关 键 词: | 鸡胚胎干细胞 雄性生殖细胞 分化 卵泡刺激素 |
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