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青海湖裸鲤TNNI1和TNNI2基因克隆及其响应盐碱胁迫的表达研究
引用本文:许保可,阿琳林,张海琛,等.青海湖裸鲤TNNI1和TNNI2基因克隆及其响应盐碱胁迫的表达研究[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2023,51(10):1-10.
作者姓名:许保可  阿琳林  张海琛  
作者单位:青海大学 省部共建三江源生态与高原农牧业国家重点实验室,生态环境工程学院
基金项目:国家自然科学基金项目“青海湖裸鲤鳞片缺失发育的分子机理”(31660745);国家自然科学基金项目“青海湖裸鲤耐盐碱关键蛋白的鉴定及其调控机理的研究”(31960741)
摘    要:【目的】克隆青海湖裸鲤慢收缩骨骼肌型肌钙蛋白I基因(TNNI1)和快收缩骨骼肌型肌钙蛋白I基因(TNNI2),分析其在不同组织及盐碱胁迫环境下皮肤和腹侧肌肉组织中的表达水平,为揭示青海湖裸鲤生长缓慢及恢复青海湖裸鲤鱼类资源提供基础数据。【方法】以青藏高原特有鱼类青海湖裸鲤为研究材料,利用RACE技术克隆TNNI1和TNNI2基因全长cDNA序列,进行氨基酸序列同源性比对;利用实时荧光定量PCR法检测2个基因在青海湖裸鲤鳃、眼、脑、脾脏、肝脏、肠、肾、心、皮肤、腹侧肌肉组织的表达情况,以及盐碱胁迫下腹侧肌肉和皮肤组织中的表达规律。【结果】青海湖裸鲤TNNI1 cDNA序列全长为1 211 bp,其中开放阅读框540 bp,共编码179个氨基酸;TNNI2 cDNA序列全长为737 bp,其中开放阅读框531 bp,共编码176个氨基酸。序列同源性分析发现,青海湖裸鲤TNNI1氨基酸序列与安水金线鲃的同源性高达92.13%,TNNI2氨基酸序列与鲤鱼的同源性最高为92.61%。系统发育树结果显示,从TNNI1氨基酸序列来看,青海湖裸鲤与金线鲃属鱼类、鲫鱼、鲤鱼的亲缘关系较近;从TNNI2氨基酸序列来看,青海湖裸鲤与鲤鱼的亲缘关系最近,其次是鲫鱼和金线鲃属鱼类。TNNI1和TNNI2基因在青海湖裸鲤不同组织中均有表达,且在腹侧肌肉中相对表达量最高。盐碱胁迫条件下,TNNI1和TNNI2基因在肌肉组织中的相对表达量均显著下调;在皮肤组织中TNNI1的相对表达量极显著下调(P<0.01),而TNNI2极显著上调(P<0.01)。【结论】成功克隆了青海湖裸鲤TNNI1、TNNI2基因全长;TNNI1、TNNI2基因在腹侧肌肉组织中高表达,表明其与肌肉组织发育密切相关;盐碱胁迫条件下TNNI1、TNNI2基因在腹侧肌肉组织中的表达均显著下调,提示2个基因表达量降低可能是青海湖裸鲤生长缓慢的重要因素。

关 键 词:青海湖裸鲤  肌钙蛋白  TNNI1基因  TNNI2基因  盐碱胁迫
收稿时间:2022/6/27 0:00:00

Cloning of TNNI1 and TNNI2 genes of Gymnocypris przewalskii and expression analysis in response to salinity-alkali stress
XU Baoke,A Linlin,ZHANG Haichen,et al.Cloning of TNNI1 and TNNI2 genes of Gymnocypris przewalskii and expression analysis in response to salinity-alkali stress[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2023,51(10):1-10.
Authors:XU Baoke  A Linlin  ZHANG Haichen  
Abstract:
Keywords:Gymnocypris przewalskii  troponin  TNNI1 gene  TNNI2 gene  saline stress
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