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斑节对虾增殖细胞核抗原基因克隆及表达分析
引用本文:王成扬,赵超,傅明骏,邱丽华.斑节对虾增殖细胞核抗原基因克隆及表达分析[J].中国水产科学,2016,23(5):1052-1062.
作者姓名:王成扬  赵超  傅明骏  邱丽华
作者单位:1. 中国水产科学研究院南海水产研究所,广东广州510300;上海海洋大学水产与生命学院,上海201306;2. 中国水产科学研究院南海水产研究所,广东广州510300;农业部南海渔业资源开发利用重点实验室,广东广州510300;3. 中国水产科学研究院南海水产研究所,广东广州510300;农业部南海渔业资源开发利用重点实验室,广东广州510300;热带水产研究开发中心,海南三亚572018
基金项目:国家自然科学基金项目(31101903),海南省应用技术研发与示范推广专项(ZDXM2014057),广东省海洋渔业科技推广专项(A201300B03),广东省海洋渔业科技与产业发展专项(A201501A11),引进国际先进农业科学技术计划(948计划)项目(2015-Z20)
摘    要:为研究增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在斑节对虾(Penaeus monodon)卵巢发育中的功能,利用RACE技术克隆得到了斑节对虾PCNA基因(PmPCNA)的cDNA全长序列。该序列全长978 bp,包括135 bp的5′非编码区(5′UTR)、60 bp的3′UTR和编码260个氨基酸的783 bp的开放阅读框(ORF)。同源性分析结果表明,PmPCNA与其他物种具有很高的蛋白同源性。组织表达模式分析表明,PmPCNA在所监测的各组织中为组成性表达,其中在卵巢和脑中表达量较高;卵巢发育不同阶段基因的表达分析则表明PmPCNA在Ⅲ期表达量最高,是其他各期表达量的2倍;注射五羟色胺(5-hydroxy tryptamine,5-HT)后,PmPCNA在卵巢中表达量明显上升,其中在48 h表达量升高幅度最大,是对照组的5倍左右。利用原核表达技术获得了PCNA的体外重组蛋白,Western Blot分析证实该重组蛋白为PCNA蛋白。以上研究结果表明,PmPCNA蛋白是斑节对虾卵巢发育过程中的重要调节因子,本研究为进一步认识斑节对虾卵巢发育机制提供了基础资料。

关 键 词:斑节对虾  增殖细胞核抗原(PCNA)  卵巢发育  实时荧光定量PCR  5-羟色胺(5-HT)  原核表达
修稿时间:2016/9/5 0:00:00

Molecular cloning and expression analysis of PCNA from black tiger shrimp, Penaeus monodon
WANG Chengyang,ZHAO Chao,FU Mingjun,QIU Lihua.Molecular cloning and expression analysis of PCNA from black tiger shrimp, Penaeus monodon[J].Journal of Fishery Sciences of China,2016,23(5):1052-1062.
Authors:WANG Chengyang  ZHAO Chao  FU Mingjun  QIU Lihua
Institution:1. South China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Guangzhou 510300, China;2. College of Fisheries and Life Science, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China;3. Key Laboratory of South China Sea Fishery
Abstract:
Keywords:Penaeus monodon  ovarian development  PmPCNA  5-HT  qRT-PCR  prokaryotic expression
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