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短小芽孢杆菌HB-3的分离鉴定及其淀粉酶的纯化特性研究
引用本文:阎华,王会,于博,黄升谋,李云捷,吴进菊.短小芽孢杆菌HB-3的分离鉴定及其淀粉酶的纯化特性研究[J].保鲜与加工,2019,19(2):62-68.
作者姓名:阎华  王会  于博  黄升谋  李云捷  吴进菊
作者单位:湖北文理学院化学工程与食品科学学院,湖北襄阳,441053;襄阳市中心医院,湖北襄阳,441053
基金项目::湖北省高等学校优秀中青年科技创新团队计划项目(T201616);湖北文理学院食品新型工业化学科群建设项目
摘    要:从湖北省襄阳市三九酿酒厂下水道污泥分离筛选得到产淀粉酶菌株HB-3,根据菌株生长形态和生理生化特征分析,初步鉴定为短小芽孢杆菌。短小芽孢杆菌HB-3在淀粉培养基上培养72 h后,淀粉酶活力达到120.0 U/mL。然后使用DEAE-52和CM-52阴阳离子交换层析柱对短小芽孢杆菌HB-3产生的淀粉酶进行了部分纯化。结果表明,短小芽孢杆菌HB-3中淀粉酶经过部分纯化后,纯化倍数为5.9,酶活力回收率为90.9%。纯化后的淀粉酶使用SDS-PAGE凝胶电泳研究,以标准蛋白为对照,计算出短小芽孢杆菌HB-3中淀粉酶分子量为56.5 kDa。同时对短小芽孢杆菌HB-3的淀粉酶进行了纯化特性研究,结果表明,该酶的酶促反应最适温度为50℃,40~60℃热稳定性良好;该酶的酶促反应最适pH为5.0,pH 4.0~6.0酸碱稳定性良好,该酶对底物淀粉的反应动力学米氏常数K_m为0.062 mmol/L,最大反应速率Vmax为3.019 mmol/(L·min)。

关 键 词:短小芽孢杆菌  淀粉酶  鉴定  纯化

Isolation and Identification of Bacillus pumilus HB-3 and Purification Characteristics of Amylase
YAN Hua,WANG Hui,YU Bo,HUANG Sheng-mou,LI Yun-jie,WU Jin-ju.Isolation and Identification of Bacillus pumilus HB-3 and Purification Characteristics of Amylase[J].Storage & Process,2019,19(2):62-68.
Authors:YAN Hua  WANG Hui  YU Bo  HUANG Sheng-mou  LI Yun-jie  WU Jin-ju
Institution:(School of Chemical Engineering and Food Science,Hubei University of Arts and Science,Xiangyang 441053,China;Xiangyang Central Hospital,Xiangyang 441053,China)
Abstract:YAN Hua;WANG Hui;YU Bo;HUANG Sheng-mou;LI Yun-jie;WU Jin-ju(School of Chemical Engineering and Food Science,Hubei University of Arts and Science,Xiangyang 441053,China;Xiangyang Central Hospital,Xiangyang 441053,China)
Keywords:Bacillus pumilus  amylase  identification  purification
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