| Vip3Aa10与甜菜夜蛾刷状缘膜囊泡的结合特性 |
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| 引用本文： | 李婷,张淑臣,申晓鸿,师光禄,刘京国.Vip3Aa10与甜菜夜蛾刷状缘膜囊泡的结合特性[J].北京农学院学报,2019,34(1). |
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| 作者姓名： | 李婷 张淑臣 申晓鸿 师光禄 刘京国 |
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| 作者单位： | 北京农学院植物科学技术学院,北京,102206;北京农学院生物科学与工程学院/农业部华北都市农业重点实验室,北京,102206 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;北京市市属高等学校高层次人才引进与培养计划长城学者培养计划 |
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| 摘 要： | 【目的】营养期杀虫蛋白Vip3A是一种由苏云金芽孢杆菌在对数生长期产生的新型杀虫毒素。Vip3A与敏感昆虫中肠上皮细胞的结合是其发挥杀虫活性的关键步骤。为进一步探究Vip3A毒素的杀虫机理,研究Vip3Aa10与甜菜夜蛾刷状缘膜囊泡(BBMVs)的结合特性。【方法】在大肠杆菌中用IPTG诱导表达Vip3Aa10,用亲和层析和离子交换层析的方法纯化蛋白,并用胰蛋白酶活化Vip3Aa10,得到Vip3Aa10-T。然后分析Vip3Aa10前毒素和Vip3Aa10-T对甜菜夜蛾的杀虫活性,用免疫印迹法和配体印迹法分析Vip3Aa10-T与甜菜夜蛾BBMVs的结合特性以及在甜菜夜蛾BBMVs上的结合蛋白。【结果】Vip3Aa10-T与Vip3Aa10前毒素对甜菜夜蛾的杀虫活性很高。Vip3Aa10-T在pH8.0时更容易与甜菜夜蛾BBMVs结合,并且能够与非敏感性昆虫黄粉虫BBMVs结合。在相同pH条件下,Vip3Aa10前毒素比Vip3Aa10-T更容易与甜菜夜蛾BBMVs结合。Vip3Aa10-T在甜菜夜蛾BBMVs上有4条结合蛋白,其分子量分别为80、38、31和22kDa。【结论】活化的Vip3Aa10与甜菜夜蛾BBMVs的结合是pH依赖性的,并且能与BBMVs上的4个蛋白结合。
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| 关 键 词： | Vip3Aa10 甜菜夜蛾 刷状缘膜囊泡 杀虫活性 |
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