| 重组人gdnf在人乳腺肿瘤上皮细胞中表达的研究 |
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| 引用本文： | 张学明,丁海麦,席海燕,李斌,张晶晶,虞飞.重组人gdnf在人乳腺肿瘤上皮细胞中表达的研究[J].江苏农业科学,2015(2). |
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| 作者姓名： | 张学明 丁海麦 席海燕 李斌 张晶晶 虞飞 |
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| 作者单位： | 内蒙古科技大学包头医学院,内蒙古包头,014040 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(编号31060304)；内蒙古高等学校科学研究项目(编号NJ10184)。 |
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| 摘 要： | 为了在人乳腺肿瘤上皮细胞系中表达重组人胶质细胞源性神经营养因子(GDNF),本研究构建了牛β-casein基因启动子驱动的重组人GDNF乳腺上皮细胞特异表达载体,用脂质体介导法将其导入人乳腺肿瘤上皮细胞系Bcap-37细胞中,经G418抗性筛选8~10 d后,分离稳定表达红色荧光蛋白的转染细胞,PCR鉴定转基因细胞,用催乳素、胰岛素及氢化可的松诱导培养转基因细胞,RT-PCR和Western Blot检测重组人GDNF的表达分泌。结果表明:重组人GDNF乳腺上皮细胞特异表达载体被成功构建,转染Bcap-37细胞后,稳定整合到细胞染色体中,转基因细胞经激素诱导后能够表达分泌糖基化的GDNF,为高效制备与天然人GDNF蛋白结构完全一致的重组人GDNF蛋白用于帕金森病临床治疗研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 人乳腺肿瘤上皮细胞系 生物反应器 胶质细胞源性神经营养因子 表达载体 帕金森病 |
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