犬α干扰素的原核表达及活性检测 |
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引用本文: | 殷玉和,李莹莹,刘新涛,吴丛梅.犬α干扰素的原核表达及活性检测[J].畜牧与兽医,2012,44(7):69-72. |
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作者姓名: | 殷玉和 李莹莹 刘新涛 吴丛梅 |
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作者单位: | 长春工业大学化学与生命科学学院,吉林长春,130012 |
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基金项目: | 吉林省科技发展计划项目 |
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摘 要: | 本研究合成了编码CaIFN-α蛋白的基因片段,分别与温度诱导表达载体pBV220和化学诱导表达载体pET20b连接,构建了pBV220-CaIFN-α和pET20b-CaIFN-α重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21,通过温度诱导和IPTG诱导表达,CaIFN-α蛋白表达量分别为25%和20%。对比两方法诱导表达结果,确定最佳诱导方法为温度诱导。表达菌经超声破碎、变性、复性、疏水层析和分子筛层析后,得纯化的CaIFN-α蛋白,纯度约为96%。利用MDCK(犬肾细胞)-VSV(水疱性口炎病毒)体系,测定纯化后CaIFN-α蛋白的生物学比活性为3×107U/mg。
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关 键 词: | 犬干扰素α 原核表达 纯化 生物学活性 |
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