| 重组猪β防御素2在毕赤酵母中的表达及其鉴定 |
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| 引用本文： | 解民,仲飞,李秀锦,吴凌娟,李凌,李巍.重组猪β防御素2在毕赤酵母中的表达及其鉴定[J].中国兽医学报,2010,30(8). |
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| 作者姓名： | 解民 仲飞 李秀锦 吴凌娟 李凌 李巍 |
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| 作者单位： | 河北农业大学,动物科技学院,河北,保定,071001 |
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| 基金项目： | 河北省科技支撵计划资助项目，河北农业大学校长基金 |
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| 摘 要： | 根据GenBank猪β防御素2(pBD-2)的氨基酸序列,参照酵母偏爱的密码子,设计无信号肽序列的pBD-2的基因编码序列,并由公司合成.将合成的基因通过SnaB Ⅰ和Not Ⅰ位点插入到酵母表达载体pPIC9K的α因子信号肽序列下游,构建成pBD-2基因的分泌表达载体pPIC9K/pBD-2.利用电穿孔法将经Sal Ⅰ线性化的pPIC9K/pBD-2质粒导入毕赤酵母GS115中,通过G418加压筛选得到His+Mut+表型的高拷贝转化子.经PCR检测证明pBD-2基因在毕赤酵母染色体上得到整合.阳性重组酵母经摇瓶发酵培养和甲醇诱导,用SDS-PAGE方法在发酵上清中检测到重组pBD-2的存在,说明构建重组酵母菌能够分泌性表达pBD-2.琼脂孔穴扩散法检测结果显示,pBD-2对金黄色葡萄球菌有较好的抑菌活性.
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| 关 键 词： | 猪β防御素2 毕赤酵母 分泌表达 抗菌活性 |
Expression and characterization of recombinant porcine β-defensin-2 gene in Pichia pastoris |
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| XIE Min,ZHONG Fei,LI Xiu-jin,WU Ling-juan,LI Ling,LI Wei.Expression and characterization of recombinant porcine β-defensin-2 gene in Pichia pastoris[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2010,30(8). |
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| Authors: | XIE Min ZHONG Fei LI Xiu-jin WU Ling-juan LI Ling LI Wei |
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