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狂犬病毒糖蛋白单、双拷贝基因重组腺病毒的构建
引用本文:谭业平,祝艳蕾,陈爱娥,郭霄峰.狂犬病毒糖蛋白单、双拷贝基因重组腺病毒的构建[J].中国兽医学报,2010,30(8).
作者姓名:谭业平  祝艳蕾  陈爱娥  郭霄峰
作者单位:华南农业大学,兽医学院,广东,广州,510642
基金项目:农业部公益性行业科研专项,广东省动物防疫检疫研究专项
摘    要:将携带狂犬病毒糖蛋白单、双拷贝基因的穿梭栽体pShuttle-G和pShuttle-dG分别经PmeⅠ线性化后电转化含E1和E3区缺失的人5型腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的感受态菌株BJ5183-AD-1进行细菌内同源重组,经抗性筛选,PcR、PacⅠ酶切及测序鉴定.构建了狂犬病毒糖蛋白单、双拷贝基因重组腺病毒质粒pAdHu5-G和pAdHu5-dG,线性化后分别转染Ad-293细胞进行病毒包装.结果显示,在第4天发生细胞病变效应,且荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白的表达;western-blot证实2株重组腺病毒表达的糖蛋白能被特异性单抗识别;遗传稳定性分析显示,病毒传至10代时单G和双G基因均稳定遗传,没有发生缺失和突变.为比较分析2株重组腺病毒糖蛋白的表达时效及免疫效果奠定了基础.

关 键 词:狂犬病毒  糖蛋白  重组腺病毒

Construction of recombinant adenoviruses expressing one and two copies of the rabies virus glycoprotein gene
TAN Ye-ping,ZHU Yan-lei,CHEN Ai-e,GUO Xiao-feng.Construction of recombinant adenoviruses expressing one and two copies of the rabies virus glycoprotein gene[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2010,30(8).
Authors:TAN Ye-ping  ZHU Yan-lei  CHEN Ai-e  GUO Xiao-feng
Abstract:
Keywords:
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