| 禽流感病毒PB2亚单位抗血清的制备 |
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| 引用本文： | 葛叶,邓国华,李雪平,陈化兰.禽流感病毒PB2亚单位抗血清的制备[J].中国兽医学报,2010,30(6). |
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| 作者姓名： | 葛叶 邓国华 李雪平 陈化兰 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 国家"十五"科技攻关资助项目 |
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| 摘 要： | 采用RT-PCR方法分段扩增PB2基因,将目的基因定向克隆至含HisTAG的原核表达载体pET-32a,经序列验证正确后,转化BL21大肠杆菌,诱导表达重组蛋白。靶蛋白经Ni+柱纯化后与弗氏免疫佐剂混合免疫新西兰大耳白兔,获得高效价的抗PB2的抗血清。Western-blot检测结果证实制备的抗血清可与PB2蛋白发生特异性反应。进一步将PB2全长基因准确插入真核表达载体pCAGGS,转染293T细胞表达PB2蛋白,通过IFA检测发现,抗血清与细胞表达的PB2蛋白发生反应,出现特异性荧光,经激光共聚焦检测PB2亚单位只在细胞核中出现荧光,说明PB2亚单位单独表达仅限于细胞核内。上述研究为进一步探索PB2亚单位的生物学特性及其结构与功能研究打下基础。
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| 关 键 词： | 流感病毒PB2 抗血清 原核表达 真核表达 |
Preparation of polyclonal antibody of avian influenza virus PB2 subunit |
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| GE Ye,DENG Guo-hua,LI Xue-ping,CHEN Hua-lan.Preparation of polyclonal antibody of avian influenza virus PB2 subunit[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2010,30(6). |
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| Authors: | GE Ye DENG Guo-hua LI Xue-ping CHEN Hua-lan |
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