| 贝类派琴虫和单孢子虫二重荧光定量PCR方法的建立 |
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| 引用本文： | 谢丽基,谢芝勋,庞耀珊,刘加波,邓显文,谢志勤.贝类派琴虫和单孢子虫二重荧光定量PCR方法的建立[J].中国兽医学报,2010,30(7). |
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| 作者姓名： | 谢丽基 谢芝勋 庞耀珊 刘加波 邓显文 谢志勤 |
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| 作者单位： | 广西兽医研究所,广西,南宁,530001 |
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| 基金项目： | 国家百千万人才工程人选专项资金项目，广西科技攻关资助项目 |
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| 摘 要： | 根据基因库中派琴虫和单孢子虫基因组的保守序列,设计了2对特异性引物和2条用不同荧光基团标记的TaqMan探针。对反应条件和试剂浓度进行优化,建立能够同时检测派琴虫和单孢子虫的二重荧光定量PCR方法。该方法特异性好,对派琴虫和单孢子虫的检测敏感性分别达到400和40个模板拷贝数;此外抗干扰能力强,对派琴虫和单孢子虫不同模板浓度进行组合,仍可有效地同时检测这2个原虫。对广西沿海的49份贻贝病料进行检测,结果派琴虫阳性率为16.3%,检测的派琴虫含量为2.38×106～9.21×102拷贝/μL;提示派琴虫广泛存在于中国南方沿海的养殖贝类中,建立的荧光定量PCR方法可以用于贝类派琴虫的临床快速检测。该方法对单孢子虫检测的敏感性比派琴虫高,而49份贻贝病料未检出单孢子虫,提示需要进行更多临床样品的检测。
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| 关 键 词： | 派琴虫 单孢子虫 二重荧光定量PCR |
Development of a duplex real-time PCR assay for detection of Perkinsus and Haplosporidium in shellfish |
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| XIE Li-ji,XIE Zhi-xun,PANG Yao-shan,LIU Jia-bo,DENG Xian-wen,XIE Zhi-qin.Development of a duplex real-time PCR assay for detection of Perkinsus and Haplosporidium in shellfish[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2010,30(7). |
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| Authors: | XIE Li-ji XIE Zhi-xun PANG Yao-shan LIU Jia-bo DENG Xian-wen XIE Zhi-qin |
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