猪圆环病毒2型Rep蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 |
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引用本文: | 高梅,彭喆,吴晓燕,时建立,辛长勋,郑书轩,刘玉伟,王硕,王金宝,李俊.猪圆环病毒2型Rep蛋白单克隆抗体的制备及鉴定[J].家畜生态学报,2018,39(10):59-63. |
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作者姓名: | 高梅 彭喆 吴晓燕 时建立 辛长勋 郑书轩 刘玉伟 王硕 王金宝 李俊 |
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作者单位: | 山东师范大学生命科学院;山东省农业科学院畜牧兽医研究所;青岛农业大学动物医学院 |
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摘 要: | 本研究旨在制备猪圆环病毒2型(PCV2)Rep蛋白单克隆抗体。PQE30-PCV2Rep蛋白在IPTG的诱导下表达,用SDS-PAGE对表达产物进行检测。将纯化的重组蛋白免疫小鼠,制备单克隆抗体,ELASA法鉴定抗体亚型及效价。结果显示重组蛋白PQE30-PCV2Rep得到高效表达,筛选获得了3株稳定分泌抗Rep蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系1G4、2G4和6H12,其分泌的抗体分别为IgG2a、IgG2b、IgG2b亚型。其中,6H12抗体效价为256K,浓度为0.47mg/mL,纯度90%。本研究制备的单克隆抗体有较好的生物学特性,为PCV2的研究及快速诊断提供了新的方法。
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