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荷斯坦牛脊椎畸形综合征TaqMan荧光PCR检测方法的建立与应用
引用本文:刘志玲,吴晓薇,康伟,朱道中,刘中勇,陈增荣,郭霄峰.荷斯坦牛脊椎畸形综合征TaqMan荧光PCR检测方法的建立与应用[J].华南农业大学学报,2015,36(5):26-30.
作者姓名:刘志玲  吴晓薇  康伟  朱道中  刘中勇  陈增荣  郭霄峰
作者单位:1 广东出入境检验检疫局 检验检疫技术中心,2 广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室,,1 广东出入境检验检疫局 检验检疫技术中心,2 广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室,,3 广州出入境检验检疫局,,1 广东出入境检验检疫局 检验检疫技术中心,2 广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室,,1 广东出入境检验检疫局 检验检疫技术中心,2 广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室,,3 广州出入境检验检疫局,,4 华南农业大学 兽医学院,
基金项目:公益性行业(质检)科研专项(201210122)
摘    要:【目的】建立快速筛查牛脊椎畸形综合征(Complex vertebral malformation,CVM)基因携带者的方法,在牛群中逐渐淘汰CVM基因携带者以减少养牛业损失.【方法】根据Gen Bank已发表的CVM基因的SLC35A3基因序列,设计合成了2对特异性引物和2条TaqMan探针,建立了牛脊椎畸形综合征Ta Man探针检测方法.对方法的特异性和敏感性进行分析后,应用该方法对临床样本进行检测,并与测序方法进行比较.【结果和结论】该方法能有效区分突变型、野生型和杂合型个体.各种基因型的检测灵敏度为:突变型质粒拷贝数1×10~3μL~(-1),杂合型质粒拷贝数1×10~4μL~(-1),野生型质粒拷贝数5×10~3μL~(-1).从292份荷斯坦牛全血中检出6份CVM基因携带者,与测序方法结果一致.本研究建立的方法简便快捷、准确率高,适合大样本筛选和口岸现场快速筛查.

关 键 词:荷斯坦牛  脊椎畸形综合征  TaqMan  荧光PCR
收稿时间:2014/7/30 0:00:00

Establishment and application of TaqMan real-time PCR to detect the complex vertebral malformation in Holstein cattle
LIU Zhiling,WU Xiaowei,KANG Wei,ZHU Daozhong,LIU Zhongyong,CHEN Zengrong and GUO Xiaofeng.Establishment and application of TaqMan real-time PCR to detect the complex vertebral malformation in Holstein cattle[J].Journal of South China Agricultural University,2015,36(5):26-30.
Authors:LIU Zhiling  WU Xiaowei  KANG Wei  ZHU Daozhong  LIU Zhongyong  CHEN Zengrong and GUO Xiaofeng
Abstract:
Keywords:Holstein cattle  complex vertebral malformation  TaqMan real-time PCR
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