| 布鲁菌缺失疫苗株M5-ΔznuA和M5-Δbp26-ΔznuA的构建及毒力和免疫原性的评估 |
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| 引用本文： | 刘翠翠,马思思,王佳莹,吴云燕,易琳,赵明秋,陈金顶.布鲁菌缺失疫苗株M5-ΔznuA和M5-Δbp26-ΔznuA的构建及毒力和免疫原性的评估[J].华南农业大学学报,2015,36(5):18-25. |
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| 作者姓名： | 刘翠翠 马思思 王佳莹 吴云燕 易琳 赵明秋 陈金顶 |
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| 作者单位： | 华南农业大学 兽医学院,华南农业大学 兽医学院,华南农业大学 兽医学院,华南农业大学 兽医学院,华南农业大学 兽医学院,华南农业大学 兽医学院,华南农业大学 兽医学院 |
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| 基金项目： | 广东省教育部产学研结合项目（2011B090400259）;公益性行业（农业）科研专项（201203056） |
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| 摘 要： | 【目的】利用分子生物学技术,通过同源重组的方法构建了新型的羊种布鲁菌Brucella melitensis减毒活疫苗株,为布鲁菌的防治提供新的选择.【方法】以羊种布鲁菌减毒活疫苗M5株及缺失bp26基因的M5-Δbp26缺失突变株为亲本株,利用电击转化法,将含有znuA基因上下游同源臂的自杀质粒转入到亲本株中,通过同源重组敲除znuA基因.对构建的新型基因缺失株进行生物学特性及毒力的鉴定与分析.【结果和结论】PCR及核苷酸序列测序结果表明,羊种布鲁菌减毒活疫苗znuA单基因缺失株和bp26、znuA双基因缺失株均构建成功,分别将其命名为M5-ΔznuA和M5-Δbp26-ΔznuA.与亲本株相比,2种缺失突变株的生物学特性没有显著性差异;体外连续传至20代后,菌落PCR和核苷酸测序结果显示M5-ΔznuA和M5-Δbp26-ΔznuA株具有良好的遗传稳定性.小鼠脾脏质量和脾脏菌落数表明,M5-Δbp26-ΔznuA双基因缺失株毒力最弱,单基因缺失株M5-ΔznuA和M5-Δbp26次之.血清中抗体水平的监测显示,znuA基因的缺失对布鲁菌减毒活疫苗诱导机体体液免疫的能力没有影响.获得了免疫原性保持良好而毒力减弱的羊种布鲁菌减毒活疫苗基因突变株M5-ΔznuA和M5-Δbp26-ΔznuA.
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| 关 键 词： | 布鲁菌 znuA基因 基因缺失株 毒力 免疫原性 |
| 收稿时间： | 8/9/2014 12:00:00 AM |
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