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| 产肠毒素大肠杆菌K88ab/K88ad菌毛操纵子fae全基因的克隆、表达及生物学活性的初步研究 | |
| 引用本文： | 郁磊,吴娟,朱军,朱国强.产肠毒素大肠杆菌K88ab/K88ad菌毛操纵子fae全基因的克隆、表达及生物学活性的初步研究[J].中国预防兽医学报,2013,35(1):23-27. |
| 作者姓名： | 郁磊 吴娟 朱军 朱国强 |
| 作者单位： | 1. 扬州大学兽医学院,江苏扬州225009;南京农业大学动物医学院,江苏南京210095 2. 扬州大学兽医学院,江苏扬州225009;南京天邦生物科技有限公司,江苏南京211102 3. 扬州大学兽医学院,江苏扬州,225009 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(30571374、30771603、31072136、31270171);江苏省属高校自然科学重大基础研究项目(08KJA230002);江苏高校优势学科建设工程资助项目;教育部创新团队;科技部转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08006-004B) |
| 摘 要： | 为研究K88ab/K88ad菌毛对细胞的黏附作用,本研究分别以产肠毒素E.coli (ETEC) K88ab C83901株和K88ad C83903株基因组DNA为模板,采用PCR技术扩增这两种K88菌毛操纵子fae基因(均约7.9 kb).将其分别克隆于表达质粒pBR322中构建pBR-K88ab和pBR-K88ad重组质粒,并将其分别转化至不含任何菌毛的E.coli SE5000株中.该重组菌能够分别与鼠抗K88菌毛阳性血清和抗K88菌毛单克隆抗体(MAb)产生凝集反应；在电镜下观察到重组菌表面大量表达K88菌毛.采用热抽提法提取其体外表达的K88ab和K88ad菌毛,SDS-PAGE电泳检测结果显示,菌毛蛋白的分子量约为26 ku.玻板凝集试验和western blot结果表明:重组表达的K88ab及K88ad菌毛与K88+参考株菌毛均能够被抗K88菌毛阳性血清和MAb识别.以猪小肠上皮细胞系IPEC-J2为模型进行黏附和黏附抑制试验,结果表明表达K88菌毛的重组菌及K88+参考株均能够黏附于IPEC-J2上皮细胞表面；而且阳性血清和MAb能够有效抑制重组菌或K88+参考株对猪小肠上皮细胞系的黏附结合. |
| 关 键 词： | 产肠毒素大肠杆菌 K88菌毛 克隆 生物活性 |
Cloning and expression of K88ab/K88ad fimbrial operons from enterotoxigenic Escherichia coli and their bioactivity |
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| YU Lei , WU Juan , ZHU Jun , ZHU Guo-qiang.Cloning and expression of K88ab/K88ad fimbrial operons from enterotoxigenic Escherichia coli and their bioactivity[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2013,35(1):23-27. | |
| Authors: | YU Lei WU Juan ZHU Jun ZHU Guo-qiang |
| Institution: | 1(1.College of Veterinary Medicine,Yangzhou University,Yangzhou 225009,China;2.College of Veterinary Medicine,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China;3.Nanjing Tianbang Bio-Industry Company Limited,Nanjing 211102,China) |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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