| 嗜水气单胞菌J-1株OmpA融合蛋白的高效表达及免疫原性分析 |
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| 引用本文： | 蒋蔚,刘永杰,陆承平.嗜水气单胞菌J-1株OmpA融合蛋白的高效表达及免疫原性分析[J].中国水产科学,2008,15(2):301-306. |
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| 作者姓名： | 蒋蔚 刘永杰 陆承平 |
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| 作者单位： | 南京农业大学,农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏,南京,210095 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金
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教育部科研项目
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国际科学基金(IFS) |
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| 摘 要： | 以嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）J-1株基因组为模板，根据GenBank已发表的嗜水气单胞菌外膜蛋白的基因序列设计1对引物，扩增去除信号肽序列的成熟外膜蛋白OmpA的基因片段，定向克隆至表达质粒pET32a（＋）中，重组质粒经限制性酶切鉴定后测序。结果表明，插入片段长度为948bp，与NCBI上登录的几个相关序列相比，同源性在93．1％-95％之间，缺失4个氨基酸。将重组原核表达质粒pET32a-OmpA转化至大肠杆菌BL21（DE3），经诱导可表达分子量约57．4kD的蛋白，凝胶薄层扫描显示OmpA在转化菌中表达量占全菌蛋白的50％以上。用兔抗J-1株总外膜蛋白血清进行Western blot，在57．4kD处有明显反应条带。融合蛋白经Ni-NTA树脂柱亲和层析纯化后免疫新西兰兔制备抗血清，ELISA效价达1：12800以上。Western blot检测结果显示，该血清与9株具有代表性的气单胞菌的分子量约35kD的外膜蛋白均有较强反应，说明所表达的融合蛋白不仅保持原有外膜蛋白的免疫原性，而且提示OmpA可能是嗜水气单胞菌的共同保护性抗原。中国水产科学，2008，15（2）：301—306]
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| 文章编号： | 1005-8737-（2008）02-0301-06 |
| 收稿时间： | 2007-05-11 |
| 修稿时间： | 2007-10-20 |
Expression and immunogenicity analysis of the fusion protein OmpA from Aeromonas hydrophila strain J-1 |
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| JIANG Wei,LIU Yong-jie,LU Cheng-ping.Expression and immunogenicity analysis of the fusion protein OmpA from Aeromonas hydrophila strain J-1[J].Journal of Fishery Sciences of China,2008,15(2):301-306. |
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| Authors: | JIANG Wei LIU Yong-jie LU Cheng-ping |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Aeromonas hydrophila fusion protein OmpA expression immunogenicity |
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