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| 柔嫩艾美耳球虫子孢子cDNA表达文库的构建 | |
| 引用本文： | 林青,才学鹏,窦永喜,翟军军,闫鸿斌,张彦明,田广孚,景志忠.柔嫩艾美耳球虫子孢子cDNA表达文库的构建[J].畜牧兽医学报,2007,38(9):999-1002. |
| 作者姓名： | 林青 才学鹏 窦永喜 翟军军 闫鸿斌 张彦明 田广孚 景志忠 |
| 作者单位： | 1. 西北农林科技大学,动物科技学院,杨凌,712100;中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,兰州,730046 2. 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,兰州,730046 3. 西北农林科技大学,动物科技学院,杨凌,712100 |
| 基金项目： | 科技部社会公益研究专项项目“畜禽重大疫病监测与控制系统研究”（2001DIA10006） |
| 摘 要： | 在无RNase污染的环境下,提取柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)子孢子RNA,进而纯化mRNA,采用Oligo(dT)引物反转录合成cDNA第一链和第二链,并在其两端加EcoRⅠ/HindⅢ定向接头。将所产生的cDNA分子定向克隆到具有EcoRⅠ/HindⅢ黏性末端的λSCREEN载体的两臂之间。用Phage Maker extract对以上连接产物进行体外包装,形成完整的噬菌体,并用该噬菌体转染大肠杆菌ER1647,进行文库容量测定和扩增。以扩增文库的DNA为模板,利用已知基因引物克隆E. tenella3-1E基因,并进行测序。结果表明,成功构建了E. tenella孢子化卵囊子孢子的cDNA文库,文库原始库容量约为4×106pfu/mL,插入片段约100~3000 bp,扩增得到特定的E. tenella3-1E基因,说明文库质量高、代表性强,为进一步从文库中筛选相关基因提供了有效的工具。 |
| 关 键 词： | 柔嫩艾美耳球虫 孢子化卵囊 子孢子 cDNA表达文库 构建 |
| 文章编号： | 0366-6964（2007）09-0999-04 |
| 修稿时间： | 2006-11-28 |
Construction of cDNA Expression Library of Eimeria tenella Sporozoites |
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| LIN Qing,CAI Xue-peng,DOU Yong-xi,ZHAI Jun-jun,YAN Hong-bin,ZHANG Yan-ming,TIAN Guang-fu,JING Zhi-zhong.Construction of cDNA Expression Library of Eimeria tenella Sporozoites[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2007,38(9):999-1002. | |
| Authors: | LIN Qing CAI Xue-peng DOU Yong-xi ZHAI Jun-jun YAN Hong-bin ZHANG Yan-ming TIAN Guang-fu JING Zhi-zhong |
| Abstract: | |
| Keywords: | Eimeria tenella sporulated oocysts sporozoites cDNA expression library construction |
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