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Asia1型口蹄疫病毒P1基因的原核表达及其抗血清的制备
引用本文:武刚,王洪梅,刘晓,王立群,于力,仲跻峰,何洪彬.Asia1型口蹄疫病毒P1基因的原核表达及其抗血清的制备[J].安徽农业科学,2011,39(5):2804-2806.
作者姓名:武刚  王洪梅  刘晓  王立群  于力  仲跻峰  何洪彬
作者单位:1. 东北农业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨,150030;山东省农业科学院奶牛研究中心,山东济南,250100
2. 山东省农业科学院奶牛研究中心,山东济南,250100
3. 东北农业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨,150030
4. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,黑龙江哈尔滨,150000
基金项目:国家转基因重大专项项目(2009ZX08007-006B); 国家自然科学基金项目(31072160); 山东省科技攻关项目(2009GG20002032); 山东省自然基金项目(Y2008D20); 兽医生物技术国家重点实验室开放课题基金项目(SKLVBF200806)
摘    要:目的]研究Asial型口蹄疫病毒P1基因原核表达及其抗血清的制备。方法]利用基因克隆技术获得Asia1型口蹄疫病毒(FM-DV)的P1基因,然后将P1基因重组到pET-32a(+)质粒中;转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导及蛋白纯化后,进行SDS-PAGE分析;将重组菌BL21培养物用超声波裂解,对该融合蛋白进行分离纯化后免疫新西兰兔,制备P1蛋白抗血清。结果]获得了重组性阳性克隆;SDS-PAGE结果表明在105 kD处出现了目的条带;Western-blot分析表明,抗血清可与原核表达的P1蛋白特异性结合,ELISA方法检测抗血清的效价可达到1∶5 120,结论]为建立FMDV的血清学诊断方法及其基因工程疫苗的研究奠定了基础。

关 键 词:Asia1型口蹄疫病毒  P1基因  原核表达  抗血清

Prokaryotic Expression of P1 gene of Type Asia1 Foot and Mouth Disease Virus (FMDV) and the Preparation of Its Antiserum
WU Gang et al.Prokaryotic Expression of P1 gene of Type Asia1 Foot and Mouth Disease Virus (FMDV) and the Preparation of Its Antiserum[J].Journal of Anhui Agricultural Sciences,2011,39(5):2804-2806.
Authors:WU Gang
Institution:WU Gang et al (College of life science,Northeast Agriculture University,Harbin,Heilongjiang 150030)
Abstract:Objective] The aim was to study on the prokaryotic expression of P1 gene of type Asia1 foot and mouth disease virus(FMDV) as well as the preparation of its antiserum.Method] The P1 gene of type Asia1 FMDV was obtained by gene cloning techniques,and then the P1 gene was cloned into pET-32a(+) plasmid;subsequently transformed the recombinant plasmid into E.coli BL21(DE3),after the IPTG induction and protein purification,SDS-PAGE was carried out;the ultrasonic wave was use to lyse the cultivated recombinant ...
Keywords:Foot-and-mouth disease virus(FMDV)  P1 gene  Prokaryotic expression  Antiserum  
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