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罗氏沼虾诺达病毒单克隆抗体的制备及应用
引用本文:刘问.罗氏沼虾诺达病毒单克隆抗体的制备及应用[J].水产学报,2005,29(4):529-533.
作者姓名:刘问
作者单位:1. 浙江大学生命科学学院,浙江,杭州,310012;浙江省淡水水产研究所鱼病研究室,浙江,湖州,313001
2. 浙江省淡水水产研究所鱼病研究室,浙江,湖州,313001
3. 浙江大学生物技术研究所,浙江,杭州,310029
4. 浙江大学生命科学学院,浙江,杭州,310012
基金项目:中国水产科学研究院科研基金(2003-4-4);浙江省自然科学基金(M303493)
摘    要:罗氏沼虾肌肉白浊病(whitish muscle disease of Macrobrachium rosenbergii)是一种发生在罗氏沼虾苗种阶段的流行病,发病虾苗出现肌肉白浊、白斑或白尾症状,死亡率高达60%以上,作者所在实验室在确定其病原是罗氏沼虾诺达病毒(Macrobrachiium rosenbergii Nodavirus,MrNV)的基础上,用MrNV免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,用间接ELISA筛选阳性孔,经有限稀释法克隆,得到12株能特异分泌抗MrNV的单兜隆抗体(Mab)的杂交瘤细胞。注射小鼠,制备腹水单克隆抗体,ELISA效价为1:10^5~10^6。亚型鉴定结果表明,有6株单抗为IgG1型,4株甲抗为IgG2a型,2株单抗为IgG2b型。12株单抗与对虾白斑综合征病毒(WSSV)和桃拉综合征病毒(TSV)均无交叉反应:挑选效价高的腹水单抗2B5,建立了检测罗氏沼虾诺达病毒的三抗体夹心酶联免疫吸附测定(TAS—ELISA)法,该方法检测灵敏度达0.98ng左右。Wesrtem blot分析表明,2B5能与MrNV 43kD的外膜蛋白特异性结合。

关 键 词:罗氏沼虾  肌肉白浊病  罗氏沼虾诺达病毒  单克隆抗体  三抗体夹心酶联免疫吸附测定
文章编号:1000-0615(2005)04-0529-05
收稿时间:2004-06-30
修稿时间:2004年6月30日

Production and application of monoclonal antibodies to Macrobrachium rosenbergii Nodavirus
LIU Wen.Production and application of monoclonal antibodies to Macrobrachium rosenbergii Nodavirus[J].Journal of Fisheries of China,2005,29(4):529-533.
Authors:LIU Wen
Institution:College of Life Science, Zhejiang University, Hangzhou 310012, China
Abstract:
Keywords:Macrobrachium rosenbergii  whitish muscle diseases  Macrobrachium rosenbergii Nodavirus(MrNV)  monoclonal antibodies  TAS-ELISA
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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