| 猪白细胞介素15基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 江云波,方六荣,肖少波,张辉,潘永飞,罗锐,李彬,陈焕春.猪白细胞介素15基因的克隆及在大肠杆菌中的表达[J].畜牧兽医学报,2007,38(8):841-845. |
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| 作者姓名： | 江云波 方六荣 肖少波 张辉 潘永飞 罗锐 李彬 陈焕春 |
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| 作者单位： | 华中农业大学动物病毒室,农业微生物国家重点实验室,武汉,430070 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30300257)，国家973基础研究项目(2005CB523200) |
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| 摘 要： | 本研究通过RT-PCR方法从用ConA刺激的猪外周血淋巴细胞中扩增出猪IL-15(pIL-15)编码序列的cD-NA,将其克隆至T载体pMD18-T后,序列测定表明pIL-15基因长度为489 bp,编码162个氨基酸。进一步通过PCR方法获得缺失其N端48 aa的信号肽序列的成熟pIL-15蛋白基因,将其亚克隆到原核表达载体pET-28a的6×His下游,构建重组表达质粒pET-pIL15,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导,重组菌体裂解物经SDS-PAGE可检测到分子量约为15 ku的重组蛋白,其表达量占总菌体蛋白量的17.5%。Western blot试验也证实表达的重组融合蛋白6×His-pIL15能够很好地与抗6×His单抗发生反应。猪IL-15基因的克隆、表达为进一步研究其功能和应用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 猪白细胞介素15 基因克隆 原核表达 |
| 文章编号： | 0366-6964（2007）08-0841-05 |
| 修稿时间： | 2006-10-18 |
Cloning and Expression of Porcine Interleukin-15 |
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| JIANG Yun-bo,FANG Liu-rong,XIAO Shao-bo,ZHANG Hui,PAN Yong-fei,LUO Rui,LI Bin,CHEN Huan-chun.Cloning and Expression of Porcine Interleukin-15[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2007,38(8):841-845. |
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| Authors: | JIANG Yun-bo FANG Liu-rong XIAO Shao-bo ZHANG Hui PAN Yong-fei LUO Rui LI Bin CHEN Huan-chun |
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| Institution: | National Key Laboratory of Agricultural Microbiology, Laboratory of Animal Virology, Huazhon g Agricultural University , Wuhan 430070 ,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | porcine IL-15 gene cloning prokaryotic expression |
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