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| 猪伪狂犬病病毒野毒和猪圆环病毒3型双重PCR检测方法的建立 | |
| 作者单位： | ;1.河南农业大学牧医工程学院;2.郑州市猪重大疫病防控重点实验室 |
| 摘 要： | 为了能够同时检测和鉴别猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)和猪圆环病毒3型(porcine circovirus type 3,PCV3)。本研究参考GenBank中公布的PRV gE基因和PCV3基因组序列,且基于PRV gE和PCV3 Rep基因的保守区域,利用Primer 5.0引物设计软件设计了2对特异性引物,随后对其扩增条件进行优化,建立了能够同时检测PRV和PCV3的双重PCR检测方法。该方法可以同时扩增PRV的429 bp和PCV3的344 bp特异性片段,而对猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪瘟病毒、猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒基因组扩增结果均为阴性。PRV和PCV3的最低检测值分别为502.0和91.2 copies/μL。结果表明该方法具有良好的特异性和灵敏性。本试验建立了能够同时快速检测PRV和PCV3,且具有高度特异性和灵敏性的双重PCR检测方法,为PRV和PCV3的检测提供技术支持。 |
| 关 键 词： | 猪伪狂犬病病毒 猪圆环病毒3型 双重PCR检测方法 |
Development of a duplex PCR for detection of porcine pseudorabies virus and porcine circovirus type 3 |
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