| 一个潜在催化莱鲍迪D苷合成的新型糖基转移酶 |
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| 引用本文： | 陈红,张绍山,肖婕妤,陈艾萌,陈治宇,王曦旎,吴卫.一个潜在催化莱鲍迪D苷合成的新型糖基转移酶[J].分子植物育种,2020(9):2872-2877. |
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| 作者姓名： | 陈红 张绍山 肖婕妤 陈艾萌 陈治宇 王曦旎 吴卫 |
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| 作者单位： | 四川农业大学农学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(No.31671757);四川农业大学创新训练计划项目(20161062604)共同资助. |
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| 摘 要： | 尿苷二磷酸糖基转移酶(uridine diphosphate glycosyltransferases,UGTs)催化糖基转移反应,与植物次生代谢密切相关。本研究根据甜叶菊(Stevia rebaudiana)转录组数据库,克隆到一个催化莱鲍迪D苷(rebaudioside D,RD)合成的新型糖基转移酶候选基因,对其开展生物信息学分析。结果表明,该基因开放阅读框长1380 bp,编码459个氨基酸,等电点(pI)预测为5.54,理论分子量约49.66 kD,系统发育分析表明该基因与向日葵中的UGT89A2同源,故将其命名为SrUGT89A2。构建pET28a-SrUGT89A2原核表达载体,并在大肠杆菌(BL21(DE3))中诱导表达得到重组蛋白,HPLC检测表明粗酶液能催化甜叶菊提取液形成一个新的色谱峰,该峰保留时间与莱鲍迪D苷一致。经进一步纯化UGT89A2蛋白,添加不同甜菊糖苷标准品为催化底物,但未鉴定出该蛋白催化的具体糖苷。该潜在催化甜菊糖RD苷合成的新型糖基转移酶基因SrUGT89A2的发现,为RD苷的生物合成和甜菊糖苷的生物途径研究提供新的理论依据。
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| 关 键 词： | 甜叶菊(Stevia rebaudiana) SrUGT89A2 RD苷 基因克隆 功能分析 |
A Novel Glycosyltransferase Potentially Catalyzing the Synthesis of Rebaudioside D |
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| Chen Hong,Zhang Shaoshan,Xiao Jieyu,Chen Aimeng,Chen Zhiyu,Wang Xini,Wu Wei.A Novel Glycosyltransferase Potentially Catalyzing the Synthesis of Rebaudioside D[J].Molecular Plant Breeding,2020(9):2872-2877. |
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| Authors: | Chen Hong Zhang Shaoshan Xiao Jieyu Chen Aimeng Chen Zhiyu Wang Xini Wu Wei |
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| Institution: | (College of Agronomy,Sichuan Agricultural University,Chengdu,611130) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Stevia rebaudiana SrUGT89A2 Rebaudioside D Gene cloning Functional analysis |
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