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马尾松幼苗PmMADS4基因的克隆及表达分析
引用本文:石长双,朱小坤,涂晶晶,吴峰.马尾松幼苗PmMADS4基因的克隆及表达分析[J].分子植物育种,2020(3):847-852.
作者姓名:石长双  朱小坤  涂晶晶  吴峰
作者单位:贵州大学
基金项目:国家重点研发计划课题(2017YFD0600302);国家自然科学基金(31660201);贵州省科技计划项目(黔科合LH字[2016]7447)和(黔科合平台人才[2019]5102)共同资助。
摘    要:MADS-box家族基因编码的转录因子,在植物、动物及微生物的发育过程中起着重要调控作用,本研究从马尾松幼苗转录组测序结果中筛选到1条具有完整开放阅读框的MADS-box基因序列,设计特异性引物并克隆获得该基因,通过生物信息学方法分析该基因的序列特征、编码蛋白的理化特性、结构域以及进化关系等,并应用荧光定量PCR技术分析该基因在马尾松幼苗不同组织中的表达活性。结果表明,克隆得到的MADS-box基因开放阅读框为672 bp,命名为Pm MADS4。Pm MADS4编码223个氨基酸,含有MADS保守域和K-box次级保守域。蛋白质理论分子量为24854.15 kD,理论等电点为7.83;其蛋白质结构主要由大量的α-螺旋(58.74%)和大量随机卷曲(31.84%)构成;亚细胞预测该基因主要在细胞核(43.5%)、线粒体(17.4%)、高尔基体(13.0%)和细胞质(13.0%)中发挥生物学作用。系统进化分析显示,Pm MADS4属于MADS-box家族基因中MIKC型的GMADS分支。组织特异性表达分析发现,Pm MADS4在马尾松幼苗的顶芽和茎中高表达,表达量分别是根部的239倍和123倍;在根部、初生叶和针叶中的表达量相对较低,表明Pm MADS4可能广泛参与马尾松幼苗地上部分分生组织的发育过程。本研究结果为Pm MADS4基因在马尾松幼苗生长发育调控方面的深入研究提供了数据基础。

关 键 词:马尾松(Pinus  massoniana)  PmMADS4  基因克隆  生物信息学  基因表达

Cloning and Expression Analysis of PmMADS4 Gene in Pinus massoniana Seedlings
Shi Changshuang,Zhu Xiaokun,Tu Jingjing,Wu Feng.Cloning and Expression Analysis of PmMADS4 Gene in Pinus massoniana Seedlings[J].Molecular Plant Breeding,2020(3):847-852.
Authors:Shi Changshuang  Zhu Xiaokun  Tu Jingjing  Wu Feng
Institution:(Institute for Forest Resources&Environment of Guizhou,Guizhou University,Guiyang,550025)
Abstract:
Keywords:Pinus massoniana  PmMADS4  Gene cloning  Bioinformatics  Gene expression
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