| 水牛 STAT5a 和 STAT5b 基因启动子克隆及其活性分析 |
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| 引用本文： | 李胜,黄时海,张艳,石德顺,李湘萍.水牛 STAT5a 和 STAT5b 基因启动子克隆及其活性分析[J].西南农业大学学报,2018,40(1):1-8. |
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| 作者姓名： | 李胜 黄时海 张艳 石德顺 李湘萍 |
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| 作者单位： | 1. 广西大学 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室，南宁 530005; 2. 广西大学 生命科学与技术学院，南宁 530005 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31560632)；广西自然科学基金项目(2016GXNSFDA380030) |
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| 摘 要： | 为了解转录激活与信号转导因子5(STAT5)在水牛乳腺发育及泌乳生理中的功能,对水牛STAT5a和STAT5b基因的5′调控区启动子序列进行了克隆,并比较其活性.根据GenBank已公布的牛STAT5a和STAT5b基因序列设计特异性引物,以广西本地水牛乳腺组织基因组DNA为模板,通过PCR法分别扩增不同长度STAT5a和STAT5b基因启动子片段并进行生物信息学分析.结果表明:克隆得到的水牛STAT5a基因启动子片段(P1和P2)大小是500bp,700bp,STAT5b基因启动子片段(P3,P4和P5)大小是500bp,800bp,1 500bp.在线分析结果显示,仅P2片段中存在高甲基化位点,且富含SP1,AP2等转录因子结合位点.将构建的不同长度启动子片段分别连入pGL3-Basic载体,分别转染水牛乳腺上皮细胞,检测荧光素酶表达水平.与未转染组相比,P1~P5质粒转染组的荧光素酶比值均显著提高(p0.05);添加5mg/mL质量浓度催乳素(PRL)处理乳腺上皮细胞,P3质粒转染组的荧光素酶比值显著高于其他各组(p0.05).以上结果表明,水牛STAT5a和STAT5b基因启动子活性均受到PRL调节,两者表达水平在水牛乳腺上皮细胞中不同,且STAT5b基因表达受PRL调控更为明显.
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| 关 键 词： | 水牛 STAT5a STAT5b 启动子 PRL 活性 |
Cloning and Activity Analysis of Buffalo STAT5a and STAT5b Promoters |
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| LI Sheng,HUANG Shi-hai,ZHANG Yan,SHI De-shun,LI Xiang-ping.Cloning and Activity Analysis of Buffalo STAT5a and STAT5b Promoters[J].Journal of Southwest Agricultural University,2018,40(1):1-8. |
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| Authors: | LI Sheng HUANG Shi-hai ZHANG Yan SHI De-shun LI Xiang-ping |
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