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牙鲆ras-2基因cDNA全长的克隆和表达分析
引用本文:韦芬,何欣慰,鲍宝龙.牙鲆ras-2基因cDNA全长的克隆和表达分析[J].上海海洋大学学报,2013,22(5).
作者姓名:韦芬  何欣慰  鲍宝龙
作者单位:上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室,上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室,上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室
基金项目:国家自然科学基金项目(31072201)
摘    要:Ras主要参与表皮生长因子家族调控细胞分裂的信号通路。本研究采用末端快速扩增法获得了牙鲆ras-2基因全长2384bp cDNA序列,该序列编码187个氨基酸,含有switchⅠ、switchⅡ、P-loop、CAAX box等Ras家族的结构特征,与川鲽ras-2氨基酸序列相似性最高(96.3%)。定量PCR检测显示ras-2基因在牙鲆成体的心脏、肝脏、脾脏、肾脏、鳃、肠、肌肉、鳍条和皮肤组织均有不同程度的表达,其中鳍条表达量最高,肌肉的表达量最低;在牙鲆变态前和变态初较高,随着变态进行,表达水平显著降低。RNA整体原位杂交结果显示ras-2基因主要在牙鲆变态阶段的鳍条、眼眶周围、颔、鳃、鼻孔、侧线等部位的表皮组织中表达,变态前在鳍条和体侧线表达信号最强,变态阶段E期的信号稍微减弱,主要分布在鳍条和鳃,变态高峰期(F期和G期)信号主要集中在鳍条、鳃和颔,H期表达信号主要集中在鳃和鳍条。ras-2基因表达式型显示,其可以通过调控细胞分裂的方式,参与牙鲆变态过程中眼睛移动、冠状幼鳍发育、侧线发育等多种器官的发育调控。

关 键 词:牙鲆  ras-2基因  变态    RNA整体原位杂交  荧光定量PCR
收稿时间:2013/3/26 0:00:00
修稿时间:6/3/2013 12:00:00 AM

Full-length cDNA Cloning and Tissues Expression Analysis of ras-2 Gene from Paralichthys olivaceus
WEI Fen,HE Xin Wei and BAO Bao-long.Full-length cDNA Cloning and Tissues Expression Analysis of ras-2 Gene from Paralichthys olivaceus[J].Journal of Shanghai Ocean University,2013,22(5).
Authors:WEI Fen  HE Xin Wei and BAO Bao-long
Institution:The Key Laboratory of Exploration and Utilization of Aquatic Genetic Resources Ministry of Education,Shanghai Ocean University,The Key Laboratory of Exploration and Utilization of Aquatic Genetic Resources Ministry of Education,Shanghai Ocean University,The Key Laboratory of Exploration and Utilization of Aquatic Genetic Resources Ministry of Education,Shanghai Ocean University
Abstract:
Keywords:Paralichthys olivaceus  ras-2  metamorphosis  whole-mount RNA in situ hybridization  RT-qPCR
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