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环介导等温扩增技术快速诊断猪肺炎支原体
引用本文:郭盼盼,黄书林,张跃伟,付萍,李旭妮,李佳禾,吴文学.环介导等温扩增技术快速诊断猪肺炎支原体[J].农业生物技术学报,2010,18(4):822-826.
作者姓名:郭盼盼  黄书林  张跃伟  付萍  李旭妮  李佳禾  吴文学
作者单位:中国农业大学动物医学院,北京,100193
摘    要:利用环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法建立了猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoinae)的快速检测方法。该方法以猪肺炎支原体保守性基因16SrRNA为靶序列设计了6条特异引物,在63℃等温条件下,30min即可完成反应。结果显示,LAMP技术优于PCR技术。在敏感性实验中,LAMP方法的能检测出10个包含靶基因片段的重组质粒,敏感性高于PCR方法10倍;特异性实验中,LAMP方法和PCR方法均显示出了高度的特异性;在对127个临床鼻拭子样本的检测中,LAMP方法检测结果是所有样本都为阳性,而PCR检测出了116份阳性。证明本研究所建立的方法,对临床样本的检测的敏感度高于常规的PCR法。LAMP方法具有操作简便、快速、高效、敏感、特异、经济的特点,在研究机构以及基层实验室、现场监测的广泛使用具有一定的潜力。

关 键 词:猪肺炎支原体(Mhp)  环介导等温扩增技术(LAMP)  PCR

Loop-mediated Isothermal Amplification for Sensitive and Rapid Detection of Mycoplasma hyopneumoniae
Guo Panpan,Huang Shulin,Zhang Yuewei,Fu Ping,Li Xuni,Li Jiahe,Wu Wenxue.Loop-mediated Isothermal Amplification for Sensitive and Rapid Detection of Mycoplasma hyopneumoniae[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2010,18(4):822-826.
Authors:Guo Panpan  Huang Shulin  Zhang Yuewei  Fu Ping  Li Xuni  Li Jiahe  Wu Wenxue
Abstract:
Keywords:PCR
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