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血清及山羊卵丘细胞共培养对猪胚胎体外发育的促进作用
引用本文:王慧利,李静心,王婧,孟春花,朱前明,张俊,钱勇,曹少先.血清及山羊卵丘细胞共培养对猪胚胎体外发育的促进作用[J].华中农业大学学报,2014,33(5):73-79.
作者姓名:王慧利  李静心  王婧  孟春花  朱前明  张俊  钱勇  曹少先
作者单位:江苏省农业科学院畜牧研究所/江苏省农业科学院动物品种改良和繁育重点实验室,南京 210014;江苏省农业科学院畜牧研究所/江苏省农业科学院动物品种改良和繁育重点实验室,南京 210014;江苏省农业科学院畜牧研究所/江苏省农业科学院动物品种改良和繁育重点实验室,南京 210014;江苏省农业科学院畜牧研究所/江苏省农业科学院动物品种改良和繁育重点实验室,南京 210014;江苏省农业科学院畜牧研究所/江苏省农业科学院动物品种改良和繁育重点实验室,南京 210014;江苏省农业科学院畜牧研究所/江苏省农业科学院动物品种改良和繁育重点实验室,南京 210014;江苏省农业科学院畜牧研究所/江苏省农业科学院动物品种改良和繁育重点实验室,南京 210014;江苏省农业科学院畜牧研究所/江苏省农业科学院动物品种改良和繁育重点实验室,南京 210014
基金项目:国家自然科学基金项目(31101715)和江苏省农业科技自主创新资金项目(CX(11)4047)
摘    要:为进一步完善猪胚胎体外发育系统,以孤雌激活胚胎为研究对象,依次对胚胎培养液种类、培养期间血清添加方式、卵丘细胞共培养体系进行筛选优化。结果表明,与常规的PZM3培养液相比,CR1aa并不适合猪胚胎的体外发育;猪胚胎在PZM3中培养4d后添加10%胎牛血清培养至第6天,体外发育能力得到显著改善,卵裂率、囊胚率、囊胚孵化率、囊胚细胞数分别达到95.1%、56.5%、27.3%、79.3;在此基础上,利用山羊卵丘细胞与猪胚胎进行共培养,将囊胚孵化率进一步提高至36.6%,初步建立了一套高效稳定的猪胚胎体外发育系统。

关 键 词:猪胚胎  体外发育  血清  共培养  凋亡
收稿时间:2013/11/5 0:00:00

Effects of serum and coculture with goat cumulus cells on in vitro development of porcine embryos
Abstract:To further improve the in vitro development systems of porcine embryos,we optimized the types of embryo culture media,the methods of serum treatment during embryo culture,the effects of coculture with cumulus cells on embryos development in vitro,using porcine parthenogenetic embryos as a model.The results demonstrated that porcine zygote medium-3(PZM3) was the suitable medium for in vitro culture of porcine embryos compared with Charles Rosenkrans 1 (CR1aa).Cultured in PZM3 from Day 0 to 4 and then added 10% fetal bovine serum from Day 4 to 6,porcine embryos showed the higher developmental capacity,with the cleavage rates,blastocyst rates,hatched blastocyst rates and cell number of blastocysts of 95.1%,56.5%,27.3% and 79.3 respectively.Based on the above,we cocultured porcine embryos with goat cumulus cells and further improved the hatched blastocyst rates to 36.6%,suggesting an efficient and stable in vitro development systems of porcine embryos was established preliminarily.
Keywords:porcine embryos  in vitro development  serum  coculture  apoptosis
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