| 家蚕脂蛋白基因BmLp-c21的表达分析及蛋白质亚细胞定位 |
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| 引用本文： | 陈琴,杨丹,聂作明,陈健,张耀洲.家蚕脂蛋白基因BmLp-c21的表达分析及蛋白质亚细胞定位[J].蚕业科学,2012(3):434-441. |
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| 作者姓名： | 陈琴 杨丹 聂作明 陈健 张耀洲 |
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| 作者单位： | 浙江理工大学生物化学研究所;浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室 |
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| 基金项目： | 浙江省自然科学基金项目(No.Y3090228);国家高技术研究发展计划“863”项目(No.2011AA100603) |
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| 摘 要： | 家蚕30 kD脂蛋白家族在家蚕的生长发育过程中具有重要的生理功能。从家蚕蛹cDNA文库中克隆到一条编码30kD蛋白质的基因cDNA序列,该序列全长2 803 bp,ORF为792 bp,编码含263个氨基酸残基的脂蛋白(low molecular 30K lipo-protein pBmHPC-21;GenBank登录号:Q00801),命名为BmLp-c21。将BmLp-c21克隆至原核表达载体pET-28a(+),转化E.coli Rosetta(DE3),IPTG诱导表达后通过亲和层析得到纯化的融合蛋白,并免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。亚细胞定位显示BmLp-c21主要存在于细胞质中,呈点状或者片状分布。通过实时荧光定量PCR和Western blotting方法,分别检测到家蚕不同发育时期和5龄幼虫不同组织中BmLp-c21 mRNA的转录水平与蛋白质的表达水平存在较大差异,在蛹期及5龄幼虫血淋巴中的mRNA转录水平和蛋白质表达水平最高。初步推测BmLp-c21在家蚕蛹的变态发育过程以及蚕体脂质的运输方面具有重要的功能。
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| 关 键 词： | 家蚕 脂蛋白基因BmLp-c21 序列特征 表达特征 多克隆抗体 实时荧光定量PCR 免疫印迹分析 亚细胞定位 |
Expression Analysis of BmLp-c21 Gene of Bombyx mori and Subcellular Localization of Its Encoded Protein |
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| CHEN Qin,YANG Dan,NIE Zuo-Ming,CHEN Jian,ZHANG Yao-Zhou.Expression Analysis of BmLp-c21 Gene of Bombyx mori and Subcellular Localization of Its Encoded Protein[J].Acta Sericologica Sinica,2012(3):434-441. |
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| Authors: | CHEN Qin YANG Dan NIE Zuo-Ming CHEN Jian ZHANG Yao-Zhou |
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| Institution: | 1,2(1Institute of Biochemistry,Zhejiang Sci-Tech University,Hangzhou 310018,China;2Zhejiang Provincial Key Laboratory of Silkworm Bioreactor and Biomedicine,Hangzhou 310018,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bombyx mori BmLp-c21 Sequence feature Expression profile Ployclonal antibody Real-time fluorescence quantitative PCR Western blotting Subcellular localization |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
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