| 牛源犬新孢子虫NcGRA7基因的克隆及原核表达分析 |
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| 引用本文： | 贾立军,张守发,李男礼.牛源犬新孢子虫NcGRA7基因的克隆及原核表达分析[J].中国预防兽医学报,2013,35(9). |
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| 作者姓名： | 贾立军 张守发 李男礼 |
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| 作者单位： | 延边大学农学院动物医学系,吉林延吉,133002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，吉林省青年科研基金，吉林省自然科学基金，延边大学科技发展计划 |
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| 摘 要： | 为了解牛源犬新孢子虫NcGRA7基因的生物学特性,本实验采用PCR技术扩增牛源犬新孢子虫NcGRA7基因,并连接至pMD-18T载体中,构建重组质粒pMD 18-NcGRA7,经PCR、酶切鉴定及测序分析,将NcGRA7基因连接到原核表达载体pGEX-4T-1中,构建重组表达质粒pGEX-NcGRA7,转化大肠杆菌BL21,筛选阳性克隆,将PCR和酶切鉴定正确的重组质粒进行IPTG诱导表达,SDS-PAGE和westem blot分析表达产物.结果表明,扩增的NcGRA7基因片段大小为701 bp,编码233个氨基酸,与GenBank中登录的NcGRA7(AF176649)核苷酸序列同源性为98.7％;western blot分析表达蛋白的分子量为52 ku,具有较好的反应原性.本实验为犬新孢子虫NcGRA7基因疫苗研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | 牛 犬新孢子虫 NcGRA7 原核表达 |
Cloning and prokaryotic expression of bovine Neospora caninum NcGRA7 gene |
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| JIA Li-jun
,
ZHANG Shou-fa
,
LI Nan-li.Cloning and prokaryotic expression of bovine Neospora caninum NcGRA7 gene[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2013,35(9). |
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| Authors: | JIA Li-jun ZHANG Shou-fa LI Nan-li |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | bovine Neospora caninum NcGRA7 prokaryotic expression |
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