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| 不同NDV株V蛋白多克隆抗体的制备和初步应用 | |
| 引用本文： | 傅强,仇旭升,陈素娟,谭磊,宋翠萍,于圣青,丁铲,彭大新.不同NDV株V蛋白多克隆抗体的制备和初步应用[J].中国预防兽医学报,2013,35(9). |
| 作者姓名： | 傅强 仇旭升 陈素娟 谭磊 宋翠萍 于圣青 丁铲 彭大新 |
| 作者单位： | 1. 扬州大学兽医学院,江苏扬州225009;中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241 2. 中国农业科学院上海兽医研究所,上海,200241 3. 扬州大学兽医学院,江苏扬州,225009 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金青年项目，国家高技术研究发展计划重大项目，江苏省青蓝工程 |
| 摘 要： | 新城疫病毒(NDV)的V蛋白是一种干扰素拮抗蛋白,该蛋白表达量的差异对NDV细胞嗜性的影响是目前的热点问题.为制备NDV V蛋白多克隆抗体,本研究以Class Ⅰ NDV 9a5b株和Class Ⅱ NDV ZJl P基因为模板扩增V蛋白PNT结构域和V蛋白半胱氨酸富集区(CTD)结构域,分别克隆至pET-28a(+)载体和pCold TF载体中,获得表达V蛋白或其CTD结构域的重组表达质粒.将重组质粒转化大肠杆菌诱导表达;纯化重组蛋白,并分别免疫小鼠,制备针对Class Ⅰ和ClassⅡNDV V蛋白的多克隆抗体.利用该多克隆抗体,western blot检测NDV 9a5b、La Sota、ZJ1、Herts/33株感染HeLa和DF1细胞后V蛋白的表达量变化.结果显示制备的多克隆抗体可以用于NDV V蛋白的检测,V蛋白在易感宿主禽源细胞中的表达量明显高于哺乳动物细胞.研究表明NDVV蛋白的表达水平与宿主细胞的种属差异相关. |
| 关 键 词： | 新城疫病毒 V蛋白 蛋白表达 多克隆抗体 细胞嗜性 |
Preparation and preliminary application of different NDV strains polyclonal antibodies against V protein |
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| Abstract: | |
| Keywords: | Newcastle disease virus V protein expression polyclonal antibody cell tropism |
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