| 牛α干扰素在毕赤酵母中的高效分泌表达及活性鉴定 |
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| 引用本文： | 王延群,张璐,李玉明,汪志艳,金家民,刘永刚,王刚,王淑杰,姜成刚.牛α干扰素在毕赤酵母中的高效分泌表达及活性鉴定[J].中国预防兽医学报,2013,35(10). |
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| 作者姓名： | 王延群 张璐 李玉明 汪志艳 金家民 刘永刚 王刚 王淑杰 姜成刚 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室/动物疫病诊断中心,黑龙江哈尔滨,150001
2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室/动物疫病诊断中心,黑龙江哈尔滨150001;东北农业大学 动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030 |
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| 基金项目： | 黑龙江省自然科学基金，国家863计划 |
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| 摘 要： | 为高效分泌表达牛α干扰素(boIFN-α),本研究通过人工合成boIFN-α基因,将目的基因克隆至表达载体pPIC9K中,构建重组质粒pPIC9K-boIFN-α,将其电转化于毕赤酵母菌株GS115,利用抗药选择压力G418筛选重组菌,对重组菌诱导表达,取上清进行SDS-PAGE和western blot检测,并优化重组菌的诱导表达条件.结果显示:筛选获得高效分泌表达boIFN-α的重组菌,其最佳诱导条件为:250 r/min,26℃培养,1％甲醇浓度诱导,诱导72 h.上清中目的蛋白表达量最高可达200 μg/mL,本研究为boIFN-α在生产中的应用奠定了基础.
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| 关 键 词： | 牛IFN-α 毕赤酵母 分泌表达 |
High-level secretory expression of bovine alpha interferon in Pichia pastoris |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | bovine IFN-α Pichia pastoris secretory expression |
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