| 猪嗜血支原体OxaA基因的同义定点突变、克隆及在Vero细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 刘明明,贾立军,薛书江,梁晚枫,张守发.猪嗜血支原体OxaA基因的同义定点突变、克隆及在Vero细胞中的表达[J].中国预防兽医学报,2013,35(7). |
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| 作者姓名： | 刘明明 贾立军 薛书江 梁晚枫 张守发 |
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| 作者单位： | 延边大学农学院动物医学系,吉林延吉,133002 |
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| 基金项目： | 公益性行业(农业)科研专项 |
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| 摘 要： | 为真核表达猪嗜血支原体(Mycoplasma suis)膜蛋白OxaA基因,本实验采用PCR技术扩增包含OxaA基因全长在内的1 561 bp序列,通过引物突变法对OxaA基因内部的两个编码蛋白障碍的碱基进行同义定点突变,应用Overlap PCR技术将3对引物扩增得到的OxaA片段进行拼接,获得能够正确翻译膜蛋白的OxaA基因序列,将鉴定正确的pVAX-OxaA重组质粒转染Vero细胞,应用IFA和western blot方法鉴定OxaA基因在Vero细胞中的表达.结果显示,突变的OxaA基因经Overlap PCR扩增获得长度为747 bp的基因片段,与GenBank中M.suis基因组的核苷酸序列同源性为98％,IFA检测OxaA基因在Vero细胞中获得瞬时表达,western blot分析表达蛋白的分子量为29 ku,具有较好的反应原性.本实验首次在真核细胞中表达了M.suis的QxaA基因,为M.suis基因疫苗的研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | 猪嗜血支原体 OxaA基因 同义定点突变 真核表达 |
Cloning of the Mycoplasma suis OxaA gene and transient expression in Vero cells |
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| LIU Ming-ming
,
JIA Li-jun
,
XUE Shu-jiang
,
LIANG Wan-feng
,
ZHANG Shou-fa.Cloning of the Mycoplasma suis OxaA gene and transient expression in Vero cells[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2013,35(7). |
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| Authors: | LIU Ming-ming JIA Li-jun XUE Shu-jiang LIANG Wan-feng ZHANG Shou-fa |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Mycoplasma suis OxaA gene synonymous site directed mutation eukaryotic expression |
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