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| 豌豆ISSR-PCR反应体系的建立和优化 | |
| 引用本文： | 曾亮,李敏权,杨晓明,赵丽娟,杨发荣.豌豆ISSR-PCR反应体系的建立和优化[J].草地学报,2012,20(3):536-539. |
| 作者姓名： | 曾亮 李敏权 杨晓明 赵丽娟 杨发荣 |
| 作者单位： | 1. 甘肃农业大学草业学院,兰州,730070 2. 甘肃农业大学草业学院,兰州730070; 甘肃省农业科学院,兰州 730070 3. 甘肃省农业科学院,兰州,730070 |
| 基金项目： | 现代农业食用豆产业技术体系专项，国家自然科学基金 |
| 摘 要： | 以豌豆(Pisum sativum L.)DNA为材料,对影响其ISSR-PCR反应体系中的5种主要因素(模板DNA量、引物浓度、dNTPs浓度、Taq酶量、退火温度)进行优化,最终确定了豌豆ISSR-PCR反应的最佳体系(20μL)为:15ng模板DNA,0.15mmol.L-1dNTP,0.5μmol.L-1ISSR引物,1UTaq DNA聚合酶,引物842号的最适退火温度为50℃。该体系的建立为今后利用ISSR技术进行豌豆属种质资源的遗传多样性分析、遗传图谱构建和基因定位奠定了技术基础。 |
| 关 键 词： | 豌豆 ISSR PCR反应体系 优化 |
Establishment and Optimization of ISSR Reaction System for Pea |
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| ZENG Liang , LI Min-quan , YANG Xiao-ming , ZHAO Li-juan , YANG Fa-rong.Establishment and Optimization of ISSR Reaction System for Pea[J].Acta Agrestia Sinica,2012,20(3):536-539. | |
| Authors: | ZENG Liang LI Min-quan YANG Xiao-ming ZHAO Li-juan YANG Fa-rong |
| Institution: | 1.College of Grassland Science,Gansu Agricultural University,Lanzhou,Gansu Province 730070,China; 2.Academy of Gansu Agriculture Science,Lanzhou,Gansu Province 730070,China) |
| Abstract: | The optimum ISSR-PCR system for peas is established using ISSR-PCR amplification with five factors(DNA template,primer,dNTPs,Taq DNA polymerase and annealing temperature).The optimum reaction system(20 μL) contains 15 ng DNA template,0.15 mmol·L-1 dNTP,0.5 μmol·L-1 ISSR primer,1U Taq DNA polymerase.The suitable annealing temperature of primer 842 is 50℃.This reaction system will provide a technological base for genetic diversity analysis of pea germplasm,genetic map construction and gene location. |
| Keywords: | Pisum sativum L ISSR PCR reaction system Optimization |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ | |