三角帆蚌ISSR-PCR优化反应体系的建立 |
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引用本文: | 李跃华,陈婵娟,许志强,葛家春.三角帆蚌ISSR-PCR优化反应体系的建立[J].江苏农业科学,2009(2). |
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作者姓名: | 李跃华 陈婵娟 许志强 葛家春 |
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作者单位: | 1. 江苏省淡水水产研究所,江苏南京,210017;江苏省野生水生动物移殖驯化及苗种繁育工程技术中心,江苏南京,210017 2. 江苏省淡水水产研究所,江苏南京,210017;南京大学生命科学学院,江苏南京,210093 |
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基金项目: | 江苏淡水珍珠蚌种质资源保护与利用(编号:BM2006703);;江苏渔业种质资源保藏与保护利用研究中心建设(编号:BM2006503);;江苏重要经济鱼类低温种质库构建及应用(编号:K2006-3) |
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摘 要: | 采用ISSR技术对三角帆蚌基因组DNA进行PCR扩增,筛选、分析了ISSR—PCR扩增时的主要影响因子,包括Mg^2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、酶浓度、甲酰胺浓度等,建立了三角帆蚌的ISSR—PCR优化反应体系,为进一步研究三角帆蚌种质资源状况奠定基础。最终确立的适用于三角帆蚌ISSR扩增的25μl反应体系为:MgCl2 1.5mmol/L,dNTPs 0.2mmol/L,引物0.2μmol/L,Taq酶1.0U,甲酰胺1%,DNA模板量约50ng。
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关 键 词: | 三角帆蚌 ISSR 体系优化 |
Estlablishment of ISSR-PCR reaction system in Hyriopsis cumingii |
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Abstract: | |
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