| 猪肌肉生长抑制素基因的克隆及原核表达 |
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| 引用本文： | 鲍淑青,张克英,陈代文,龙定彪.猪肌肉生长抑制素基因的克隆及原核表达[J].动物营养学报,2007,19(5):617-621. |
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| 作者姓名： | 鲍淑青 张克英 陈代文 龙定彪 |
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| 作者单位： | 四川农业大学动物营养研究所,雅安,625014 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 本试验旨在通过基因工程方法获得重组肌肉生长抑制素蛋白。根据基因库肌肉生长抑制素基因序列设计合成特异性引物,引物两端分别加上EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点及保护碱基,提取汉普夏猪的骨骼肌总RNA,用RT-PCR方法扩增肌肉生长抑制素全长基因,并将其克隆到pMD18-T载体上,测序后EcoRⅠ和SalⅠ双酶切,克隆到pET-30a( )中,构建原核表达载体pET-30a-M,将重组表达质粒转化至E.coliBL21(DE3)中,诱导表达。结果表明,成功扩增出肌肉生长抑制素全长基因;克隆载体经过DNA序列测定,所得基因与国外报道的完全一致;成功构建原核表达载体pET-30a-M;经IPTG诱导,表达出了6×His-M融合蛋白,用组氨酸标签抗体做Western印记证明产物大约48 ku,与预期大小相符,肌肉生长抑制素蛋白在大肠杆菌中成功的进行了表达。
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| 关 键 词： | 肌肉生长抑制素 克隆 原核表达 纯化 |
| 修稿时间： | 2007年3月23日 |
Cloning and Prokaryotic Expression of Porcine Myostatin Gene |
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| BAO Shu-qing,ZHANG Ke-ying,CHEN Dai-wen,LONG Ding-biao.Cloning and Prokaryotic Expression of Porcine Myostatin Gene[J].Acta Zoonutrimenta Sinica,2007,19(5):617-621. |
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| Authors: | BAO Shu-qing ZHANG Ke-ying CHEN Dai-wen LONG Ding-biao |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Myostati Cloning Prokaryotic expression Purification |
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