| 茶树氧甲基转移酶基因的克隆及原核表达 |
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| 引用本文： | 马成英,施江,吕海鹏,张悦,谭俊峰,郭丽,彭群华,林智.茶树氧甲基转移酶基因的克隆及原核表达[J].茶叶科学,2013(6):532-540. |
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| 作者姓名： | 马成英 施江 吕海鹏 张悦 谭俊峰 郭丽 彭群华 林智 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院茶叶研究所/茶叶加工工程研究中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30972404);现代农业产业技术体系建设专项资金资助(CARS-23);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2012zl053) |
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| 摘 要： | 获得了一类茶树氧甲基转移酶基因cDNA全长并构建了该基因的原核表达载体。以从茶树叶片中提取的总RNA为模板,结合RT-PCR与RACE克隆技术获得氧甲基转移酶(O-methyltransferase)基因cDNA全长1 280 bp,其开放阅读框为1 068 bp,编码355个氨基酸,推测的蛋白分子量为39.1 kD,理论等电点为5.68。其氨基酸序列与葡萄和蓖麻氧甲基转移酶基因相似性分别为73%、71%。将该基因片段连接到原核表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21后诱导重组蛋白的表达,经IPTG诱导,SDS-PAGE检测到1条与预测融合蛋白分子量相符的外源蛋白。
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| 关 键 词： | 茶树 氧甲基转移酶 克隆 原核表达 |
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