| 两步法玻璃化冷冻过程中卵母细胞胞内抗冻保护剂浓度的筛选 |
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| 引用本文： | 周艳华,黄文竹.两步法玻璃化冷冻过程中卵母细胞胞内抗冻保护剂浓度的筛选[J].黑龙江畜牧兽医,2018(21). |
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| 作者姓名： | 周艳华 黄文竹 |
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| 作者单位： | 贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心;贵州医科大学生物与工程学院 |
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| 摘 要： | 为了研究卵母细胞第一步经20%乙二醇(EG)处理300 s,第二步经40%EG处理30 s后细胞内EG的浓度,试验将经过上述步骤处理后的卵母细胞分别移入30%、40%或50%甘油(Gly)溶液中,测定了卵母细胞经EG处理后移入不同浓度Gly溶液时的体积,观察到在30%和40%Gly溶液中卵母细胞体积膨胀,在50%Gly溶液中卵母细胞体积收缩。鉴于第二步卵母细胞在40%EG中仅处理了30 s,如此短的时间内渗入胞内的EG较少,遂将40%EG换做渗透性较差的50%Gly用于冷冻卵母细胞,统计卵母细胞冷冻后的存活率、卵裂率及囊胚率。结果表明:以50%Gly替换40%EG冷冻卵母细胞存活率达75. 86%,经过20%EG处理300 s,40%EG处理30 s后胞内的抗Gly浓度介于40%~50%(摩尔浓度为5. 6~7. 0 mol/L)间。说明两步法玻璃化冷冻第二步采用渗透性较差的抗冻保护剂亦可获得较好的冷冻效果,第二步处理的主要作用是使卵母细胞脱水,延长第二步的处理时间是不必要的。
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