GC_SBE元件突变对绵羊Myomaker基因5'调控区活性的影响 |
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引用本文: | 朱自欣,路盟,张枫惠,秦健,李颖靓,杜荣.GC_SBE元件突变对绵羊Myomaker基因5'调控区活性的影响[J].黑龙江畜牧兽医,2018(15). |
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作者姓名: | 朱自欣 路盟 张枫惠 秦健 李颖靓 杜荣 |
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作者单位: | 山西农业大学动物科技学院;山西农业大学实验教学中心;山西农业大学生命科学学院 |
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摘 要: | 为了研究Smad蛋白结合元件GC_SBE对绵羊Myomaker基因5'调控区转录调控活性的影响,试验将GC_SBE元件突变为特定酶切位点EcoRⅠ,构建元件突变型真核表达载体MyomakerProGC_SBEM-EGFP,并转染至C2C12成肌细胞中,用荧光定量PCR法检测突变组GC_SBE元件突变对不同状态下EGFP mRNA表达的影响,同时以转染野生型绵羊MyomakerProW-EGFP真核表达载体的细胞作为对照。结果表明:成功构建了绵羊Myomaker ProGC_SBEM-EGFP载体;与对照组比较,在成肌细胞未分化状态下GC_SBE元件突变后导致EGFP mRNA表达下调,在成肌细胞分化状态下GC_SBE元件突变后则导致EGFP mRNA表达上调。说明GC_SBE元件突变对绵羊Myomaker基因5'调控区的转录调控活性存在影响,且这种影响与细胞的状态有关。
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