| 猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二重RT-PCR检测方法的建立及应用 |
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| 引用本文： | 董波,安永帅,李静楠,戴爱玲,李晓华,杨小燕.猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二重RT-PCR检测方法的建立及应用[J].黑龙江畜牧兽医,2018(19). |
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| 作者姓名： | 董波 安永帅 李静楠 戴爱玲 李晓华 杨小燕 |
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| 作者单位： | 龙岩学院生命科学学院;福建省家畜传染病防治与生物技术重点实验室 |
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| 摘 要： | 为了建立猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的快速鉴别诊断方法,试验根据GenBank中已发表的PEDV和TGEV的相关基因序列,设计合成特异性引物,分别进行单项PCR最佳反应条件的摸索;确定最佳反应条件后建立PEDV和TGEV的二重RT-PCR检测方法,并进行特异性分析;同时采用单项RT-PCR和二重RT-PCR法检测临床样本,比较两种方法的检出率。结果表明:试验成功建立了PEDV和TGEV的二重RT-PCR检测方法,经最佳退火温度摸索,二重RT-PCR法的最佳退火温度为58.1℃;经特异性分析,二重RT-PCR法对PEDV和TGEV具有很好的特异性;临床样本的检测结果显示,二重RT-PCR法与单项RT-PCR法检出率基本吻合。说明试验建立的PEDV和TGEV的二重RT-PCR检测方法可用于猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻病的快速鉴别诊断。
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