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二重PCR快速检测牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫的研究
引用本文:石云良,黄维义,张为宇,韦家周,张诗新,韦志坚,张宇.二重PCR快速检测牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫的研究[J].广西农业科学,2010,41(2):163-166.
作者姓名:石云良  黄维义  张为宇  韦家周  张诗新  韦志坚  张宇
作者单位:1. 广西大学动物科学技术学院,南宁,530005
2. 广西农垦金光乳业有限公司,南宁,530041
基金项目:广西科技攻关项目(桂科攻0719004-3E)
摘    要:根据伊氏锥虫ITS序列(FJ416612)和GenBank报道的牛巴贝斯虫棒状结合蛋白1序列(FJ588013),设计合成2对特异性诊断引物,建立了牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫的二重PCR诊断方法。结果表明,建立的二重PCR诊断方法可扩增出牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫的特异性条带,大小分别为213bp和360bp,最低检出量分别为4.00pg和0.38pg。但对牛双芽巴贝斯虫、分歧巴贝斯虫、环形泰勒虫、附红细胞体、巴氏杆菌不敏感。用该二重PCR方法对95份水牛样品和134份奶牛样品进行检测,结果发现,水牛伊氏锥虫的感染率为13.7%(13/95)、牛巴贝斯虫的感染率为7.4%(7/95),无混合感染;奶牛伊氏锥虫的感染率为3.7%(5/134)、牛巴贝斯虫的感染率为0(0/134)。说明该二重PCR方法具有敏感、快速、特异的特点,适用于牛伊氏锥虫和牛巴贝斯虫的流行病学调查。

关 键 词:二重PCR  牛伊氏锥虫  牛巴贝斯虫  快速检测

Rapid and sensitive detection of Trypanosoma evansi and Babesia boris in bovine by double PCR
SHI Yun-liang,HUANG Wei-yi,ZHANG Wei-yu,WEI Jia-zhou,ZHANG Shi-xin,WEI Zhi-jian,ZHANG Yu.Rapid and sensitive detection of Trypanosoma evansi and Babesia boris in bovine by double PCR[J].Guangxi Agricultural Sciences,2010,41(2):163-166.
Authors:SHI Yun-liang  HUANG Wei-yi  ZHANG Wei-yu  WEI Jia-zhou  ZHANG Shi-xin  WEI Zhi-jian  ZHANG Yu
Institution:1 College of Animal Science and Technology;Guangxi University;Nanning 530005;China;2 Jinguang Dairy Co.Ltd.;Guangxi State Farm;Nanning 530041;China
Abstract:Two pairs of species-specific primers(ST1 and FT2,B1 and B2) for Trypanosoma evansi and Babesia bovis were designed using the ITS sequence(FJ416612) of T.evansi and clavate binain sequences(FJ588013) of B.bovis(Obtained from GenBank),and a double PCR amplification method for the diagnosis of T.evansi and B.bovis infection was developed.The amplification products of 2136 and 360 bp corresponded to the T.evansi and B.bovis,respectively,have been resolved successfully with the lowest detection limit of 4.00 pg...
Keywords:bovine  double PCR  Trypanosoma evansi  Babesia bovis  rapid detection  
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